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質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司。
伯樂（Bio-Rad）Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款高度可靠的電轉化設備，廣泛應用于細胞轉染、基因導入、RNA干擾、蛋白質遞送等多個研究領域。通過對電場和脈沖波形的精確控制，Genepulser Xcell 可以高效、安全地導入外源物質，如DNA、RNA或蛋白質，為科學實驗提供可靠的技術保障。
在使用 Genepulser Xcell 電穿孔儀時，遵循規范的操作步驟對于確保實驗的成功、減少細胞損傷以及提升轉化效率至關重要。本文將詳細介紹 Genepulser Xcell 電穿孔儀的標準操作步驟，從準備工作、設備設置、樣品處理到實驗完成后的操作，確保每一個環節都符合最佳操作實踐。
在開始實驗前，首先確保實驗室環境滿足設備運行要求：
電源與接地：確保設備連接到穩定的220V電源，并且接地良好。接地電阻應小于1Ω，以確保電氣安全。
溫度與濕度：環境溫度應控制在20℃至25℃之間，濕度不超過70%。過高的溫度和濕度可能影響設備的運行和細胞轉染效果。
設備檢查：
確保電穿孔儀的外殼沒有損壞，所有接口完整；
檢查電極、電源線及接地線無損壞，連接牢固；
檢查設備的顯示屏、按鈕是否正常，確保無異常故障。
設備啟動前，需要進行自檢，確認系統狀態為“OK”后，才能繼續進行實驗。
電穿孔實驗中，樣品準備至關重要。樣品的濃度、緩沖液選擇以及處理方式都將直接影響轉化效果。
細胞類型：確保選擇適合電穿孔的細胞類型。常見的細胞類型包括大腸桿菌、酵母細胞、哺乳動物細胞等。每種細胞類型對電場強度和脈沖時間的要求不同。
細胞狀態：使用對數生長期的細胞，活細胞轉染效率較高。細胞應在短時間內用無離子緩沖液（如HEPES緩沖液）洗滌，去除培養基中的離子。
細胞濃度：常見濃度為10^7–10^8個細胞/mL，避免過稀或過濃的細胞懸液。
DNA/RNA質量：樣品應純度高，濃度適中。通常DNA濃度控制在50–100 ng/μL，RNA濃度保持在100–200 ng/μL之間。
緩沖液選擇：使用低導電性緩沖液（如無Ca2?、Mg2?的HEPES緩沖液），避免離子濃度過高影響電穿孔效果。
選擇合適規格的電擊杯。常用的電擊杯間距為0.1 cm、0.2 cm和0.4 cm。不同間距適用于不同類型的細胞。
電擊杯需事先清潔，使用70%酒精擦拭并晾干，避免污染。
每次實驗使用新的電擊杯，確保樣品純凈無污染。
打開電源，等待設備完成自檢，顯示屏上會顯示“System OK”提示。
確認設備顯示“Ready to Start”狀態后，方可進行實驗操作。
根據實驗類型選擇相應的模式，Genepulser Xcell 提供了多種預設模式，包括：
細菌轉化模式（E. coli Transformation）
酵母電轉化模式（Yeast Transformation）
哺乳動物細胞轉染模式（Mammalian Electroporation）
植物原生質體模式（Plant Protoplast Mode）
細胞融合模式（Cell Fusion Mode）
選擇合適的模式后，設備會自動推薦適用的電壓和脈沖時間范圍，用戶可以根據實驗需求進行微調。
電壓范圍通常在10V到2500V之間，具體電壓取決于細胞類型和實驗需求。
對于大腸桿菌等細菌，一般選擇較高的電壓（1800V至2500V）；
對于哺乳動物細胞，建議電壓范圍為250V至850V。
脈沖時間通常設定為1–10 ms，時間過長可能會導致細胞死亡。對于不同類型的細胞，時間設置也有所不同。對于細菌，脈沖時間較短，而對于哺乳動物細胞，脈沖時間適當延長可以提高轉染效果。
若實驗需要多脈沖組合模式，用戶可以設定脈沖次數和間隔時間，通常設置脈沖間隔為1–2秒，防止細胞過熱。
設置完電壓、時間等參數后，可以選擇將實驗方案保存，以便下次直接調用。
將準備好的細胞懸液加入電擊杯中。每次加載的樣品體積通常為40–80μL，電擊杯的容量不可超過最大推薦值。
確保樣品沒有氣泡，可以輕輕拍打電擊杯底部來去除氣泡。氣泡會影響電場的均勻分布，導致實驗失敗。
將電擊杯插入電極槽，確保連接緊密，電極無松動。
確保電極與樣品完全接觸，避免接觸不良導致脈沖輸出不穩定。
關閉安全蓋，系統會自動檢測蓋板是否鎖定。若蓋板未正確鎖定，設備會提示“Cover Not Closed”，并無法開始實驗。
在確認所有參數設置無誤后，按下“Start”按鈕，設備開始充電并自動放電。
顯示屏將實時顯示放電電壓、電流以及時間進度。
電壓和電流值會實時顯示在屏幕上。用戶可以觀察電壓是否穩定，確保放電過程順利。
放電完成后，設備會自動提示“Pulse Complete”，并顯示本次實驗的參數與結果。
放電完成后，立即取出電擊杯，將細胞懸液轉移至復蘇培養基中。
混合均勻并孵育10分鐘以幫助細胞恢復膜的完整性，之后可進行后續培養。
設備會自動記錄每次實驗的電壓、脈沖時間、電流等關鍵數據。實驗數據可以通過設備界面查看，或通過USB接口導出到外部存儲設備（如計算機）。
導出數據文件通常為CSV格式，可導入到數據分析軟件中進行統計分析。
數據包括實驗參數、放電時間、波形曲線等，幫助科研人員分析實驗的效果。
實驗結束后，用蒸餾水清洗電擊杯，并用70%酒精擦拭，確保沒有殘留樣品。
清潔電極表面，避免鹽分或其他污染物積聚。
用濕布清潔設備外部，確保無灰塵和污染物。
檢查設備接口是否松動，確保連接穩固。
在長期不使用時，將設備斷電，并覆蓋防塵罩。
定期檢查設備狀態，確保設備正常工作。
操作人員應佩戴防靜電手環，避免靜電損壞設備。
電壓較高時，避免直接觸摸電極或電擊杯。
若設備發生異常（如電弧、電壓波動），立即按下“Stop”按鈕停止操作。
出現故障時，及時聯系售后服務團隊進行排查。
避免將高濃度鹽溶液或高電導率緩沖液直接用于電穿孔實驗。
嚴格遵循實驗室生物安全標準處理廢棄物。
通過遵循上述標準操作步驟，用戶可以高效、安全地使用 Genepulser Xcell 電穿孔儀進行細胞轉化、基因導入等實驗。每個環節的精細操作不僅有助于提高轉化效率，還能延長設備壽命。質保期內，設備由長沙實了個驗儀器制造有限公司提供“只換不修”服務，確保用戶在使用過程中的設備穩定性與安全性。
借助這一強大且易用的設備，科研人員能夠更加精確、便捷地完成基因轉化、RNA干擾、蛋白質遞送等研究任務，推動生命科學研究向更高水平發展。
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