現貨現發隔天到達
真人真事真本事
咨詢熱線13158823830
咨詢熱線13158823830
質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司。
本文將針對《伯樂電穿孔1652660用戶手冊》進行詳盡介紹，涵蓋產品概況、系統組成、技術參數、操作流程、細胞準備、典型實驗流程、安全注意事項、維護保養、常見故障及排查、優化建議等多方面內容，力求全面、通俗、條理清晰，無重復文案。
“伯樂電穿孔1652660”是指型號為 165-2660 的 Bio?Rad （伯樂）“Gene Pulser Xcell Total System”電穿孔儀。該系統為科研實驗室提供“原核與真核細胞通用”的電穿孔（electroporation）工具，其主要功能是通過短暫高電壓電脈沖，在細胞膜上形成可逆性通道，使外源分子（如 DNA、RNA、蛋白質或染料）進入細胞內。根據官網資料，該型號輸出電壓范圍可達 10–3 000 V，支持指數衰變波與方波兩種模式。
該系統為模塊化設計，包含主機、CE 模塊（電容擴展器）、PC 模塊（脈沖控制器）、ShockPod 電擊杯室及電穿孔比色杯。用戶界面友好，內置預設程序，并支持手動編輯。
適用范圍廣泛，從細菌、酵母菌、植系原生質體到哺乳動物細胞皆可。其優勢在于高靈活性、高重復性、便于調參、實驗方案豐富。官網也強調：“Universal electroporator capable of transfecting all cell types”這一特性。
系統包含以下主要部分：
主機控制單元：包括 LCD 顯示屏、按鍵輸入（字母數字鍵與功能鍵）、菜單界面，負責程序選擇、參數設定、脈沖觸發、結果顯示。
CE 模塊（Capacitance Extender）：用于提供大電容范圍（25–3,275 μF）以適應低阻抗樣本的指數衰變或方波模式。適合真核細胞或低電阻條件。
PC 模塊（Pulse Controller）：用于控制并聯電阻（50–1,000 Ω）以適應高阻抗樣本、微生物等環境，優化指數衰變波時的時間常數。
ShockPod 電擊杯室：樣品插入用電擊杯（cuvette）位于其中，操作便捷、安全性高。
電穿孔比色杯（cuvettes）：配備不同間隙規格（如 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm）以適配不同體積、不同細胞類型的電轉化實驗。
電源適配器與安全保險裝置：適配 100–240 V, 50/60 Hz 電源輸入，確保設備全球通用。
系統包裝中，該型號165-2660包括主單元、CE 模塊、PC 模塊、ShockPod、電穿孔比色杯（共15個：5個0.1 cm間隙、5個0.2 cm、5個0.4 cm）及配套附件。
在《用戶手冊》中，技術指標為用戶正確操作、參數設定與實驗優化提供依據。以下列出該系統主要技術參數（摘選整理）：
波型（Waveform）：指數衰變 (exponential decay) 或 方波 (square wave) 兩種。
輸出電壓范圍：10 V 至 3,000 V。
在10–500 V區間：電容可選25–3,275 μF（以25 μF為增量）；在500–3,000 V區間：電容為10、25、50 μF。
并聯電阻（應用于 PC 模塊場景）：50–1,000 Ω，以50 Ω為增量；加上無限大作為開路情況下參照。
樣品電阻最低標準：在10–2,500 V時最低20 Ω；在2,500–3,000 V時最低600 Ω。
方波時序參數：10–500 V 時，脈沖持續 0.05–10 ms（以0.05 ms增量）；10–100 ms脈沖以1 ms增量；1–10脈沖；間隔0.1–10 秒。500–3,000 V時，脈沖持續0.05–5 ms，以0.05 ms增量；1–2脈沖；最小間隔5 秒。
輸入電源：100–240 V，50/60 Hz。最大功率約240 W（短時間充電時峰值）。
工作溫度：0–35 °C，濕度0–95%（無冷凝）。
尺寸與重量參考：主機：約31 × 30 × 14 cm，CE模塊：31 × 28 × 9 cm，PC模塊：31 × 28 × 5 cm；主機凈重約6.6 kg，CE模塊3.1 kg，PC模塊1.9 kg。
這些參數為用戶在實際操作中設定電壓、電容、電阻、脈沖時間提供標準依據，同時在選杯、選緩沖液、設定樣品條件、評估實驗結果時起到參考作用。
操作流程可分為開機準備、參數設定、樣品插入、觸發脈沖、后處理幾個階段。以下為分步驟指導：
將儀器連接到符合規格（100–240 V, 50/60 Hz）電源，打開主機電源。
檢查設備是否工作正常：LCD 顯示正常、按鍵響應、模塊連接穩固。
確保 CE 模塊、PC 模塊（如使用）已正確安裝，與主機連接牢固。參考手冊第 2 章連接說明。
插入電穿孔比色杯插槽，檢查是否干燥、無殘液、無氣泡。
確保操作環境干凈、無導電液體泄漏、使用絕緣手套與護目鏡。
在主機界面選擇操作模式：可選擇“預設程序”或“手動模式”。預設程序中包含常見細胞類型（細菌、酵母、哺乳動物細胞）對應的電轉參數。
若使用手動模式：輸入電壓值（如 1,200 V）、選擇或調整電容值或時間常數、設定脈沖數、脈沖間隔時間等。手冊中詳細說明如何切換參數。
根據樣品的導電性、體積、杯隙大小（0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm）等選擇合適參數。較低阻抗/大體積樣品可使用較大電容或方波模式，較高阻抗/細胞體積小則可借助 PC 模塊并聯電阻設定。
確認所有參數無誤后，將插入比色杯，并關閉 ShockPod 蓋子以確保安全。
系統自檢后可顯示“Ready”或類似提示，此時可準備觸發脈沖。
將含細胞懸液與轉入物（如 DNA、RNA）置于比色杯內，插入 ShockPod 插槽，確保方向正確。手冊提醒“電擊杯只能以正確方向插入”。
按下“Pulse”鍵或啟動按鈕，系統將對電容器充電，并在設定時刻釋放電脈沖至樣品。若出現電弧、氣泡或異常應停止操作并檢查樣品狀態。
脈沖結束后，屏幕會顯示實際電壓、時間常數、波形類型等運行結果（如成功發射、是否有放電異常等）。
立即將樣品從電擊杯轉移至預熱或回恢復培養基中，利于細胞膜修復和外源分子表達。
將樣品放入適宜溫度的孵育條件中（例如哺乳動物細胞 37 °C CO? 培養箱）。
若為細菌或酵母，可立即進行培養復蘇。
記錄實驗參數與轉染效果，以便優化和重復實驗。
關閉設備電源，清理電擊杯、更換或沖洗用過的杯體，保持設備整潔。
正確的樣品準備是獲得高轉化效率的關鍵。以下為建議流程與注意事項：
使用 0.1 cm 間隙電擊杯：適合細菌或酵母，高電場強度、體積小。
使用 0.2 cm 或 0.4 cm 間隙電擊杯：適合哺乳動物細胞或原生質體，體積相對較大，電場強度適中。
比色杯要保持無裂痕、清潔、無氣泡、無殘液影響。
樣品應懸浮在低離子強度緩沖液中，避免高導電介質（如 PBS、LB）直接使用，因為高導電性會降低電場強度并增加電弧風險。
懸液宜預冷至4 °C以降低熱損傷并提高轉化效率。
懸液體積應適當（如 50–100 μL），杯體中不要出現氣泡。
細胞應處于對數生長期（生長活躍）。
洗滌后細胞應懸浮于適宜緩沖液中，去除培養液及殘留離子。
懸液濃度可根據細胞類型而定，如常見為 ~10? cells/mL。
操作前盡量保持細胞于冰上、減少環境刺激。
外源分子量、濃度應符合典型轉染條件。
避免在懸液中含有大量雜質或己降解物。
若為哺乳動物細胞轉染大質粒、siRNA 或蛋白，建議縮短脈沖時間或調整電壓，以減少細胞死亡。
下面以哺乳動物細胞（如 293T、CHO）電穿孔為例，說明完整實驗流程：
細胞處于對數生長期，收集、離心、洗滌兩次以去除培養基和離子殘余。
將細胞懸浮在低離子緩沖液（預冷 4 °C）中，調整濃度如 1 × 10? – 5 × 10? cells/mL。
準備外源 DNA（如 2–10 μg）或 RNA/蛋白，混合入細胞懸液中，輕輕混勻、避免氣泡。
選用 0.4 cm 間隙電擊杯，加入例如 100 μL混合液，輕輕抖動排氣泡，插入 ShockPod。
在儀器上選擇“預設程序”中哺乳動物細胞對應選項，或手動輸入電壓如 1,200 V、方波模式、脈沖時間例如 10 ms、1 脈沖、間隔不適用（單次脈沖）。
按“Pulse”鍵開始操作。注意觀察是否有電弧、是否有異常提示。
脈沖結束后，立即將細胞轉移至含復蘇培養基、溫暖至 37 °C 的 CO? 孵育箱中。
24 小時后更換培養基，48–72 小時后評估轉染效率（如熒光蛋白表達、抗性篩選、生存率）。
記錄所使用參數及結果，為下次實驗優化提供依據。
通過實踐，用戶可逐步調整電壓、電容或脈沖數以兼顧轉染效率與細胞存活率。
操作高壓電穿孔設備需嚴格遵守安全規程，減少風險。以下為關鍵注意事項：
操作時務必佩戴絕緣手套、護目鏡、穿實驗室防護服。
不可在設備通電狀態下觸摸裸露電極或插入液體。
電擊杯插入前，必須關閉 ShockPod 蓋，并確認上蓋關閉良好。
若發現比色杯有裂痕、液體有氣泡、樣品混濁，應立即終止操作。
操作平臺應保持干燥，遠離水源或易導電液體。
不得頻繁連續觸發脈沖，應給設備適當冷卻時間，避免充放電過熱。
若出現電弧或誤觸，按下“Discharge”鍵或斷電處理。
操作環境應滿足工作溫度（0–35 °C）且無冷凝濕氣。
為了保證設備長期可靠運行，應進行定期維護：
使用 70% 乙醇擦拭外殼、電極連接線、ShockPod 表面。
不得使用丙酮、苯等有機溶劑清洗電極或主機面板。
清理樣品殘液、霧狀液體或污染物，避免導致導電短路。
存放于干燥、通風、無腐蝕氣體、無陽光直射環境。
長期停用前應斷電、清潔、蓋防塵罩、拔出電源。
建議每月檢查模塊連接、電極磨損、電穿孔杯使用次數。
建議每月至少用標準電阻/比色杯檢查輸出電壓及時間常數。
建議每季度檢查模塊功能、電容值穩定性、是否有電弧保護問題。
若設備提示錯誤，應聯系廠家或授權服務商進行維修（但根據開頭聲明“質保3年只換不修”）。
記錄設備的使用情況、維修記錄、實驗參數，為質量控制與溯源提供依據。
以下列出常見問題、原因分析與解決方法：
| 問題 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 無電壓輸出 | 電源未接通；保險絲燒毀；模塊未連接 | 檢查電源、模塊插口、保險絲，確保連接正確 |
| 出現電弧 / 放電異常 | 液體有氣泡；比色杯間隙過大；樣品導電性過強 | 排除氣泡、換用合適杯隙（如0.1 cm用于細菌）、降低導電性或體積 |
| 轉染效率低 | 參數不適合；細胞狀態差；DNA/混合物質量低 | 優化電壓/脈沖時間；使用對數期細胞；提高樣品純度 |
| 屏幕凍結或死機 | 靜電干擾；模塊連接不良；系統出錯 | 斷電重啟；檢查模塊連接；如仍無效送修服務 |
| 電壓偏低 / 時間常數偏差大 | 電容老化；樣品電阻異常；模塊故障 | 檢查電容模塊；測量樣品阻抗；更換模塊或聯系廠家 |
如發生嚴重硬件故障，應聯系設備供應商或廠家進行處理。鑒于本設備由廠家提供質保3年只換不修政策（開頭所述），建議在保證期內如出現硬件故障，即聯系廠方更換。
為了獲得更優的轉染效率和更高的細胞存活率，以下為一些建議：
使用 0.1 cm 間隙電擊杯 時可顯著提高電場強度，適用于細菌、酵母等高效轉化。
對于哺乳動物細胞，建議先使用低電壓、短脈沖時間方案，再根據存活率和表達率逐步提升電壓。
若使用線性 DNA、siRNA 或蛋白質轉染，可縮短脈沖持續時間以減少因較高電壓造成的細胞熱損傷。
轉染后立即置于 37 °C 孵育有助于細胞膜快速修復，從而提高表達效率。
每次實驗記錄詳細參數（電壓、電容/時間常數、脈沖數、間隔、杯隙、細胞濃度、緩沖液類型）以便優化。
分批操作大體積樣品，有助于熱量散失與電場均勻，提高整體效率。
定期檢查樣品溫度、電擊杯狀態（無裂痕、無殘液、無氣泡）以及電極連接線是否磨損。
本型號165-2660 “伯樂電穿孔儀”是一款適用于科研實驗室、支持廣泛細胞類型的高性能電穿孔系統。其模塊化設計、豐富參數設定、預設程序與手動靈活調整能力，使其在細菌、酵母、植系細胞、哺乳動物細胞等多領域應用成為得力工具。通過規范操作、細胞良好狀態、合適的緩沖液和杯隙選擇、合理參數設定與維護保養，用戶可獲得高效、穩定的轉染效果。設備若在質保期內出現硬件故障，可依據“質保3年只換不修”政策進行更換，從而降低維修成本、提高實驗保障。
建議用戶在首次使用前熟讀完整用戶手冊，嚴格遵守安全操作規范及維護建議，以延長設備壽命、保障實驗安全、提升數據可信度。
杭州實了個驗生物科技有限公司
