Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)是 Bio-Rad 推出的一款高精度、高通用性的模塊化電穿孔平臺(tái),適用于各種細(xì)胞類(lèi)型的外源分子導(dǎo)入實(shí)驗(yàn)。通過(guò)控制電流脈沖,使細(xì)胞膜瞬時(shí)穿孔,從而實(shí)現(xiàn)DNA、RNA、蛋白質(zhì)等分子的高效轉(zhuǎn)染。
與傳統(tǒng)的化學(xué)或病毒轉(zhuǎn)染方式相比,電穿孔具有更高的通用性、無(wú)載體依賴(lài)、安全性高等特點(diǎn)。伯樂(lè)的這套系統(tǒng)集成了指數(shù)波與方波脈沖輸出,可靈活配置模塊,滿(mǎn)足科研人員從細(xì)菌、酵母到哺乳動(dòng)物細(xì)胞、干細(xì)胞甚至植物原生質(zhì)體的電轉(zhuǎn)化需求。
Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)采用模塊化設(shè)計(jì),由以下幾個(gè)核心組件構(gòu)成:
控制整個(gè)平臺(tái)的參數(shù)輸入、執(zhí)行邏輯和程序管理;
內(nèi)建LCD圖形界面與功能按鍵;
支持實(shí)時(shí)電壓、電流、電阻、電容讀取;
可保存100組用戶(hù)自定義程序。
輸出指數(shù)衰減波形,適用于敏感細(xì)胞,如哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物原生質(zhì)體;
電容支持范圍廣(25–3275 μF),可微調(diào)精度至25 μF;
支持并聯(lián)電阻配置,適應(yīng)不同細(xì)胞的膜電性。
輸出方波脈沖,專(zhuān)為大腸桿菌、酵母等原核細(xì)胞設(shè)計(jì);
可設(shè)置脈沖時(shí)間(0.05–10 ms)與脈沖次數(shù)(1–10次);
可調(diào)整脈沖間隔時(shí)間(0.1–10秒),支持連續(xù)電擊。
與電穿孔比色皿連接,用于實(shí)際電極放電;
自動(dòng)識(shí)別比色皿插入狀態(tài),避免空擊操作;
適配0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm三種標(biāo)準(zhǔn)比色皿。
項(xiàng)目 | 參數(shù)說(shuō)明 |
---|---|
電壓輸出范圍 | 10–3000 V(可調(diào)) |
電容(CE模塊) | 25–3275 μF,步進(jìn)單位25 μF |
方波脈沖寬度(PC) | 0.05–10 ms(可設(shè)) |
脈沖次數(shù) | 1–10 次 |
脈沖間隔 | 0.1–10 秒 |
電阻設(shè)定 | 50–1000 Ω + 無(wú)限大(開(kāi)路) |
輸出波形 | 指數(shù)波、方波 |
存儲(chǔ)程序數(shù)量 | 用戶(hù)自定義程序×100組 |
比色皿兼容 | 0.1 cm / 0.2 cm / 0.4 cm |
顯示與輸入方式 | LCD + 按鍵界面 |
操作溫度范圍 | 0–35°C(非冷凝) |
最大功耗 | 240 W(滿(mǎn)負(fù)載) |
細(xì)胞類(lèi)型 | 推薦波形 | 間隙 | 電壓范圍 | 電容/脈寬 |
---|---|---|---|---|
HEK293 | 指數(shù)波 | 0.4 cm | 250–300 V | 950–1250 μF |
CHO | 指數(shù)波 | 0.4 cm | 300–400 V | 800–1100 μF |
大腸桿菌 | 方波 | 0.1 cm | 1500–1800 V | 5 ms |
酵母 | 方波 | 0.2 cm | 1200–1500 V | 6–7 ms |
原生質(zhì)體 | 指數(shù)波 | 0.4 cm | 400–600 V | 1200–2000 μF |
干細(xì)胞 | 指數(shù)波 | 0.4 cm | 200–300 V | 1100–1350 μF |
準(zhǔn)備新鮮細(xì)胞,處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;
清洗細(xì)胞并重懸于專(zhuān)用電穿孔緩沖液中;
與目標(biāo)DNA/RNA等外源分子混合均勻。
接通主機(jī)電源,連接所需模塊(CE 或 PC);
插入ShockPod槽;
在主機(jī)界面選擇或設(shè)定所需程序參數(shù);
裝入無(wú)氣泡樣品于比色皿中,插入ShockPod。
按下“Pulse”按鈕;
脈沖電擊釋放,系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)記錄電壓與放電過(guò)程;
電擊完成后立即將細(xì)胞轉(zhuǎn)入恢復(fù)液或培養(yǎng)基中。
孵育細(xì)胞于37°C環(huán)境下5–10分鐘;
轉(zhuǎn)移至合適培養(yǎng)體系中繼續(xù)培養(yǎng),進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)如轉(zhuǎn)染效率、蛋白表達(dá)、篩選等。
指數(shù)波適合柔弱細(xì)胞;方波適合原核類(lèi)硬膜細(xì)胞。
可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要細(xì)調(diào)電壓、電容、電阻、脈沖時(shí)間。
使用者可僅選配所需模塊,降低成本;
后續(xù)可升級(jí)拓展,保護(hù)投資。
系統(tǒng)具備電弧檢測(cè)、電極保護(hù)、電壓異常自停等功能。
中文界面+圖形菜單,便于上手;
快速存取常用參數(shù),減少手動(dòng)設(shè)置時(shí)間。
使用前檢查比色皿干燥無(wú)鹽漬;
不可在空載狀態(tài)下執(zhí)行電擊;
操作時(shí)佩戴手套,注意高壓警告。
每次使用后用無(wú)水乙醇或純水清潔ShockPod;
每月檢查電纜與接口是否松動(dòng);
不使用時(shí)斷電、蓋上防塵罩,存放于干燥環(huán)境。
問(wèn)題現(xiàn)象 | 可能原因 | 解決方法 |
---|---|---|
電弧放電 | 液體有氣泡或?qū)щ娞珡?qiáng) | 重新配液、去除氣泡 |
無(wú)法啟動(dòng)電擊 | 比色皿未插緊或參數(shù)過(guò)載 | 檢查插槽、調(diào)整設(shè)置 |
細(xì)胞死亡率高 | 電壓過(guò)高或恢復(fù)不當(dāng) | 降低電壓、延長(zhǎng)恢復(fù)時(shí)間 |
Gene Pulser Xcell 適用于以下研究和工業(yè)方向:
分子克隆:高效導(dǎo)入質(zhì)粒至菌株;
基因編輯:導(dǎo)入CRISPR系統(tǒng)至細(xì)胞系或干細(xì)胞;
疫苗開(kāi)發(fā):轉(zhuǎn)染抗原編碼序列至表達(dá)系統(tǒng);
合成生物學(xué):構(gòu)建工程化菌株;
植物轉(zhuǎn)化:植物原生質(zhì)體DNA導(dǎo)入與表達(dá);
蛋白表達(dá)平臺(tái):優(yōu)化宿主菌株表達(dá)效率。
Bio-Rad Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)是一款專(zhuān)為現(xiàn)代分子生物學(xué)研發(fā)需求設(shè)計(jì)的高性能平臺(tái),兼具穩(wěn)定性、靈活性與智能控制。其強(qiáng)大的脈沖設(shè)定能力和多細(xì)胞兼容性,為研究人員提供了高效且可重復(fù)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化方案。
無(wú)論是在高校基礎(chǔ)研究還是在企業(yè)級(jí)生物工程項(xiàng)目中,該系統(tǒng)都能勝任多樣化的轉(zhuǎn)染需求,是提升實(shí)驗(yàn)效率和數(shù)據(jù)質(zhì)量的重要工具。
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