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伯樂（Bio-Rad）電轉儀是一種專業用于蛋白質轉膜的實驗設備，廣泛應用于Western Blot實驗中，將SDS-PAGE分離的蛋白從凝膠轉移到膜上（如PVDF或NC膜），為后續抗體雜交檢測做準備。該儀器依靠電場作用完成蛋白遷移，可實現高效、清晰的蛋白條帶轉移。
伯樂電轉系統根據應用場景分為多個版本，包括傳統濕轉系統（如Mini Trans-Blot? Cell）和快速轉膜系統（如Trans-Blot? Turbo?），滿足不同用戶在轉膜速度、精度、通量和操作便捷性上的需求。
主機電源模塊：設定電壓、電流和運行時間，帶有液晶顯示。
轉膜模塊：包括電極板、支撐夾層、轉膜卡夾、冷卻系統等。
電極接口和導線：紅黑兩極對應陽極和陰極。
轉膜耗材：
聚丙烯酰胺凝膠；
膜（PVDF或NC）；
濾紙（Whatman）；
轉膜緩沖液。
當電流通過轉膜夾層時，蛋白質在電場作用下從凝膠遷移到膜上（陰極→陽極方向）。轉移過程保持蛋白構象穩定，且盡量避免蛋白擴散或降解。成功轉膜的關鍵是：
合理設置電壓、電流；
確保夾層結構無氣泡；
緩沖液電導性適中、溫度控制良好。
凝膠處理：
電泳完成后取出凝膠，切除泳道不需要區域；
剪裁至合適尺寸，保留蛋白條帶區域。
膜處理：
NC膜可直接使用；
PVDF膜需用甲醇活化1分鐘后轉入水→緩沖液中平衡；
剪裁大小略大于凝膠，確保完全覆蓋。
緩沖液配制：
常用Tris-Glycine緩沖液，含20%甲醇；
配好后低溫保存，使用時冷卻至4°C。
濾紙和墊層準備：
濾紙和海綿墊剪裁與凝膠大小一致；
浸泡在冷緩沖液中至少5分鐘，充分潤濕。
裝配順序如下（自下而上）：
黑色電極（陰極）側：
海綿墊
濾紙
凝膠
膜（PVDF/NC）
濾紙
海綿墊
每層鋪放后，用玻棒輕輕滾壓去除氣泡，尤其是凝膠-膜之間。
固定夾具夾緊后插入電泳槽，保證方向正確：
黑色（陰極）連接凝膠面；
紅色（陽極）連接膜面；
電流方向為“黑進紅出”。
根據蛋白大小和膠厚度設置不同參數：
| 條件 | 電壓(V) | 時間(h) | 推薦類型 |
|---|---|---|---|
| 小分子蛋白 | 100 | 1 | 快速轉膜 |
| 中分子蛋白 | 100 | 1.5 | 標準轉膜 |
| 大分子蛋白 | 70 | 2–3 | 長時低壓轉膜 |
溫馨提示：電流不應超過350 mA，確保緩沖液不升溫過快。
啟動電源，監控電壓、電流及溫度。
完成后關閉電源，取出膜并進行短暫染色（如Ponceau S）確認蛋白轉移效果。
用純水沖洗去除染色劑，晾干或封閉，準備后續抗體孵育步驟。
該型號主打5–10分鐘快速轉膜，可大幅提高效率，適合高通量或緊急實驗需求。
使用專用Turbo轉膜包（包括預制凝膠-膜夾層）；
插入電轉模塊后，主機自動識別程序；
啟動后自動完成電壓調節與運行；
轉膜完成后立即可用于免疫檢測。
PVDF膜：
機械強度高、蛋白結合能力強；
需甲醇預處理；
適合后續長期保存或剝離。
NC膜：
操作簡便，價格低；
容易脆裂、不適合高溫剝離。
膜與凝膠必須緊密貼合；
轉膜前去除所有氣泡；
緩沖液要充分預冷，防止蛋白變性。
可將膜朝電場方向略傾斜放置，促進定向遷移；
對大分子蛋白使用SDS加入轉膜緩沖液，增強釋放；
多重轉膜實驗需更換新膜避免污染。
| 問題現象 | 可能原因 | 建議對策 |
|---|---|---|
| 條帶無信號 | 蛋白未轉出 / 膜裝反 / 轉膜不足 | 檢查方向 / 延長時間 |
| 條帶彌散 | 轉膜電壓過高 / 熱積聚 | 降低電壓 / 冷卻緩沖液 |
| 泡痕干擾 | 膜與凝膠間有氣泡 | 重裝夾層 / 滾去氣泡 |
| 條帶偏移 | 夾層不均勻 / 濾紙厚薄不一 | 使用一致濾紙 / 調整壓力 |
| 電流過高 | 液面過高 / 漏液 | 控制緩沖液體積 / 檢查夾緊 |
使用后及時清洗電泳槽和電極板；
定期擦拭主機外殼，保持通風干燥；
存儲時將電源線和電極線松弛收好；
若長期不使用，應斷電保存，防止電容老化。
將膜分段與兩個凝膠結合，用于同批樣本不同抗體染色，提高效率。
轉膜后預染蛋白或Ponceau S染色可提前判斷條帶對應泳道，減少后期誤識。
利用蛋白標準曲線與膜圖像系統聯用，實現半定量分析。
伯樂電轉儀以其精密性、兼容性與高穩定性在蛋白轉膜實驗中發揮著至關重要的作用。通過標準操作流程、合理參數設置與細致日常維護，實驗人員可以獲得高質量、重復性強的轉膜結果。
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