伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款高性能的生物電轉化設備,專為基因導入、細胞融合及分子遞送實驗設計。
其原理是通過高壓脈沖使細胞膜瞬時形成可逆性微孔,外源 DNA、RNA 或蛋白分子即可進入細胞內部,從而實現轉化或轉染。
該設備具有高電壓精度、波形穩定、操作簡便和安全保護完善的特點,適用于細菌、酵母、真核細胞及植物原生質體的分子生物學研究。
| 項目 | 參數范圍 |
|---|---|
| 電壓輸出范圍 | 10–3000 V(連續可調) |
| 電容范圍 | 25–3275 μF |
| 電阻范圍 | 50–1000 Ω 或 ∞ |
| 波形類型 | 指數衰減波、方波 |
| 脈沖次數 | 1–10 次 |
| 時間常數 | 0.05–10 ms |
| 電源要求 | AC 220 V ±10%,50/60 Hz |
| 功率 | 200 W |
| 尺寸 | 310 × 280 × 150 mm |
| 重量 | 約 7.5 kg |
| 工作溫度 | 20–25℃ |
| 相對濕度 | 30–70% |
伯樂電穿孔儀 165-2660 采用模塊化設計,結構清晰,便于維護和擴展。
包括高壓發生器、電容組、放電控制模塊、電源系統和微處理器控制單元,是整個儀器的核心。
用于容納電擊杯并完成高壓放電過程,內置電極接觸端與蓋鎖安全檢測裝置。
可根據實驗類型選擇 CE 模塊(電容擴展)或 PC 模塊(方波控制),實現多種電擊模式。
包括 LCD 顯示屏、方向鍵、功能鍵(MENU、ENTER、SAVE、PULSE)等,用于參數設置與數據讀取。
內置多重安全機制:蓋鎖檢測、過壓保護、過溫報警、自動放電及電弧防護。
當電場強度達到細胞膜擊穿閾值時,膜兩側電位差導致脂質雙層重排,形成可逆微孔。外源分子在電場作用下進入細胞,隨后細胞膜自我修復。
關鍵參數:
電壓與電場強度決定穿孔效果;
電容決定能量釋放速度;
電阻與時間常數決定放電波形;
波形類型影響細胞響應特性。
科學控制這些參數即可實現高效、穩定的電穿孔實驗。
溫度:20–25℃;
濕度:30–60%;
工作臺需平整、防震、干燥;
電源穩定且接地良好(接地電阻 ≤ 1 Ω);
環境無腐蝕性氣體、強磁場及水汽;
不可與高功率設備共線使用。
確認電源線和接地線連接牢固;
檢查 ShockPod 內部干燥清潔;
插入模塊(CE 或 PC),確認卡扣到位;
打開電源開關,儀器自動執行系統自檢;
自檢通過后,顯示“READY”進入主界面。
若出現錯誤代碼,應根據提示排查(如蓋鎖未閉合、電壓異常、風扇停轉等)。
儀器提供三種工作模式,操作人員可根據實驗需求靈活選擇。
內置多種常用細胞類型的推薦參數。
進入主菜單 → 選擇“Preset Protocol”;
選擇目標細胞類型(如 E. coli、Yeast、CHO 等);
系統自動載入參數。
用戶可自定義所有參數。
電壓:10–3000 V;
電容:25–3275 μF;
電阻:50–1000 Ω 或 ∞;
波形:方波 / 指數衰減波;
脈沖次數:1–10 次;
系統自動顯示時間常數。
保存常用實驗方案,最多可存儲 99 組參數。
路徑:MENU → User Program → Save/Load。
使用健康、活性良好的對數生長期細胞;
洗滌細胞以去除高鹽培養基;
使用低鹽緩沖液(如無離子 PBS);
重懸濃度:
細菌:1×10? cells/mL;
酵母:1×10? cells/mL;
哺乳動物細胞:1×10?–1×10? cells/mL;
加入 DNA/RNA 溶液并輕輕混勻;
將樣品與電擊杯一同在冰上預冷 5 分鐘。
將約 80% 容積樣品加入電擊杯;
輕敲杯壁排除氣泡;
放入 ShockPod 內槽,確認電極接觸良好;
關閉上蓋,聽到“咔噠”聲即表示鎖定。
按 “PULSE” 鍵啟動充電;
顯示屏提示 “CHARGING…”;
當提示 “READY TO PULSE” 時按 “ENTER”;
放電完成后屏幕顯示電壓、時間常數和能量釋放值;
放電結束后等待“COMPLETE”提示再開蓋。
放電后立即將樣品轉移至恢復培養基中,按實驗類型培養:
細菌:37℃,30 分鐘;
酵母:30℃,60 分鐘;
哺乳動物細胞:37℃,1–2 小時。
放電前必須確保蓋鎖閉合;
實驗時不得接觸 ShockPod、電擊杯或連接線;
禁止使用含鹽或高導電緩沖液;
每次放電間隔至少 10 秒;
若出現電弧或異味,應立即斷電;
使用穩壓電源,避免電壓波動;
嚴禁私自拆解或改裝儀器;
放電時人員應遠離金屬器具;
保持 ShockPod 干燥,防止漏電;
電源線、保險絲應由專業人員更換。
每次實驗后系統自動保存:
放電電壓(Vout);
時間常數(τ);
電阻(Ω);
能量釋放比例(%Energy);
日期與編號。
插入 USB 存儲設備;
進入菜單“Data Export”;
選擇格式(CSV 或 TXT);
文件自動生成,可導入電腦分析。
| 問題現象 | 可能原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 儀器無法啟動 | 電源線松動或保險絲損壞 | 檢查電源并更換保險絲 |
| 電弧閃光 | 緩沖液含鹽或有氣泡 | 使用低鹽 buffer、排除氣泡 |
| 時間常數偏短 | 樣品導電性過高 | 調整 buffer 離子濃度 |
| 輸出電壓偏低 | 模塊接觸不良或電源不穩 | 重新插緊模塊或使用穩壓器 |
| 無法放電 | 蓋未鎖定或系統錯誤 | 檢查蓋鎖狀態并重新設置 |
| 風扇噪音大 | 灰塵堆積 | 清理通風口與風扇 |
| 數據導出失敗 | USB 未識別 | 更換存儲設備 |
關閉電源并拔下插頭;
用無水乙醇擦拭外殼和操作面板;
清潔 ShockPod 內槽并晾干;
電擊杯沖洗干凈后放回包裝盒。
檢查電源線、風扇、接地線;
清理通風口灰塵;
檢查電極表面有無氧化。
測試電壓輸出精度;
校正時間常數;
檢查模塊插口是否松動。
由專業技術人員進行高壓系統檢測與軟件升級;
更換風扇濾網與老化部件。
存放環境溫度 10–30℃,濕度 30–60%;
環境干燥通風,遠離腐蝕性化學品;
不可堆放重物在設備上方;
長期停用時覆蓋防塵罩;
每月通電運行 5 分鐘保持系統活性;
運輸時使用原包裝箱并保持水平。
電壓控制:電壓過低轉化率低,過高則細胞死亡,應逐級優化;
電容選擇:大電容延長能量釋放時間,有利于真核細胞轉化;
波形調整:細菌適用指數衰減波,真核細胞適用方波;
預冷操作:樣品與電擊杯預冷 4℃ 提高存活率;
多脈沖策略:真核細胞使用 2–3 次低電壓脈沖可提升導入率;
恢復時間:電擊后及時轉入培養基,有助于細胞修復。
為保證設備長期準確運行,應定期執行以下校驗:
| 項目 | 方法 | 允許誤差 |
|---|---|---|
| 輸出電壓 | 標準高壓探頭測量 | ±2% |
| 時間常數 | 外部示波器測定 | ±0.05 ms |
| 波形平滑性 | 示波器觀察 | 無畸變 |
| 安全系統 | 測試蓋鎖與過壓保護 | 響應正常 |
每半年應進行一次完整校準,并保存校準報告。
儀器屬高壓設備,嚴禁私自拆卸;
放電后需等待 5 秒再取出樣品;
操作時禁止飲食及攜帶液體;
不得在潮濕環境下開機;
發現異味或異常聲響應立即斷電;
嚴禁非專業人員維修。
檢查設備與樣品準備;
開機并完成系統自檢;
選擇模式與設置參數;
加樣并放入 ShockPod;
蓋緊上蓋并確認鎖定;
執行放電(PULSE);
記錄電壓與時間常數;
轉移樣品恢復培養;
清潔儀器與電擊杯;
關閉電源、導出數據。
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