隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,電穿孔作為一種高效、非病毒的細(xì)胞轉(zhuǎn)染手段,已廣泛應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)移、DNA疫苗研究、基因編輯和合成生物學(xué)等多個前沿領(lǐng)域。電穿孔的核心在于向細(xì)胞施加短暫的高壓電脈沖,暫時改變細(xì)胞膜通透性,從而使外源核酸、蛋白或藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。為滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,Bio-Rad公司推出的Gene Pulser Xcell?系統(tǒng)提供了靈活、安全、精準(zhǔn)的電穿孔解決方案,是目前實(shí)驗(yàn)室常用的高端穿孔儀之一。
Gene Pulser Xcell是一款模塊化電穿孔平臺,具備指數(shù)衰減波(Exponential Decay)和方波(Square Wave)兩種脈沖模式,適配從哺乳動物細(xì)胞、細(xì)菌、酵母、藻類到植物原生質(zhì)體等多種細(xì)胞類型。其核心設(shè)計(jì)理念是為用戶提供“精確控制 + 高度適配 + 安全可靠”的穿孔體驗(yàn)。系統(tǒng)可通過不同模塊組合,支持不同實(shí)驗(yàn)需求,如大規(guī)模樣品處理、復(fù)雜轉(zhuǎn)染流程和參數(shù)優(yōu)化研究。
電壓范圍:10–3000伏,覆蓋常規(guī)與高壓穿孔需要。
電容范圍:10–3275微法,提供從短脈沖到長脈沖的全覆蓋。
脈沖類型:指數(shù)衰減波與方波自由切換。
脈沖持續(xù)時間:0.05–10毫秒,可定制脈沖間隔與次數(shù)。
電阻范圍:50–1000歐姆,外接或模擬細(xì)胞阻抗。
Gene Pulser Xcell可根據(jù)用戶需求加載以下模塊:
主機(jī)單元(Main Unit):核心控制模塊,提供電壓輸出與數(shù)據(jù)接口。
電容擴(kuò)展模塊(CE Module):用于調(diào)節(jié)電容,實(shí)現(xiàn)長脈沖或特殊參數(shù)組合。
脈沖控制模塊(PC Module):激活方波功能,支持哺乳動物細(xì)胞特定轉(zhuǎn)染。
ShockPod? 電極架:固定標(biāo)準(zhǔn)電穿孔槽,保障安全與精準(zhǔn)電極對接。
圖形化LCD屏幕,實(shí)時顯示電壓、電流、脈沖時間等關(guān)鍵參數(shù)。
旋鈕與軟鍵菜單,便于參數(shù)快速設(shè)定與程序調(diào)用。
內(nèi)存功能,可保存多個實(shí)驗(yàn)參數(shù)方案,支持快速重現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件。
指數(shù)衰減波適用于細(xì)菌、酵母和植物細(xì)胞;而方波脈沖適用于哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染,尤其是對懸浮細(xì)胞系如Jurkat、THP-1等表現(xiàn)出更高存活率與轉(zhuǎn)染效率。用戶可按細(xì)胞類型快速切換脈沖模式。
通過主機(jī)與兩個獨(dú)立模塊組合,用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)階段調(diào)整配置。如只需微生物轉(zhuǎn)化,則主機(jī)即可滿足;若涉及高要求哺乳動物轉(zhuǎn)染,則配合PC模塊可拓展更多參數(shù)空間,控制脈沖形狀、時間和重復(fù)次數(shù)。
無論是大腸桿菌、釀酒酵母、原代神經(jīng)元還是原生質(zhì)體,Gene Pulser Xcell均提供可靠的轉(zhuǎn)染效率。其穿孔設(shè)置靈活,配合0.1cm、0.2cm、0.4cm的標(biāo)準(zhǔn)穿孔槽,滿足從高電阻到低電阻細(xì)胞環(huán)境。
系統(tǒng)可儲存常用穿孔參數(shù),自帶程序庫涵蓋不同細(xì)胞類型推薦值,大大降低初學(xué)者試錯成本。每次運(yùn)行后自動顯示脈沖圖、時間常數(shù)、電壓、電流,有助于后續(xù)數(shù)據(jù)追蹤與優(yōu)化。
設(shè)備具備電弧抑制機(jī)制與自動電容放電保護(hù)功能,避免因穿孔槽液體鹽分過高導(dǎo)致電擊短路。同時,內(nèi)部風(fēng)冷系統(tǒng)維持設(shè)備在長時間運(yùn)行下的穩(wěn)定性,適合高通量轉(zhuǎn)染需求。
將待轉(zhuǎn)染細(xì)胞洗滌并重懸于無血清電穿孔緩沖液中。依據(jù)細(xì)胞類型加入核酸、質(zhì)粒或RNA分子,避免加入高離子強(qiáng)度組分。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)對象選擇指數(shù)衰減波或方波程序。輸入所需電壓、電容、電阻及脈沖時間等參數(shù),或從設(shè)備中調(diào)用預(yù)設(shè)程序。
將細(xì)胞液轉(zhuǎn)入合適間隙的電穿孔槽,插入ShockPod電極夾中,合上蓋板并按Pulse鍵進(jìn)行電擊操作。系統(tǒng)完成后自動顯示穿孔結(jié)果圖。
立即將電擊后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入預(yù)溫的培養(yǎng)基中,避免離子濃度突變導(dǎo)致細(xì)胞滲透壓失衡。哺乳動物細(xì)胞建議恢復(fù)2小時后進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
適用于哺乳動物細(xì)胞短期表達(dá)系統(tǒng)、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染構(gòu)建或基因敲除實(shí)驗(yàn),常配合CRISPR/Cas9體系導(dǎo)入gRNA與Cas9質(zhì)粒。
在DNA疫苗開發(fā)中,電穿孔已被證實(shí)能顯著提升疫苗載體DNA在目標(biāo)組織中表達(dá)水平,Gene Pulser Xcell為該類實(shí)驗(yàn)提供高通量電轉(zhuǎn)支持。
高效轉(zhuǎn)化釀酒酵母、乳酸菌、放線菌等對常規(guī)方法不敏感的微生物,為代謝通路改造與合成生物學(xué)提供基礎(chǔ)支撐。
配合高電壓短脈沖,系統(tǒng)可用于植物細(xì)胞原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化,廣泛應(yīng)用于植物功能基因驗(yàn)證與作物轉(zhuǎn)基因材料構(gòu)建。
相較于市場其他穿孔設(shè)備,Gene Pulser Xcell在電壓控制精度、模塊化程度與用戶界面上更具優(yōu)勢。設(shè)備設(shè)計(jì)既滿足科研型項(xiàng)目需求,也適用于工業(yè)級應(yīng)用場景。對比其他品牌設(shè)備,其最大的優(yōu)勢在于“雙模式+全自動診斷+參數(shù)可存儲重現(xiàn)”,特別適合有高要求的科研團(tuán)隊(duì)或教學(xué)單位。
每次穿孔后應(yīng)立即清洗電穿孔槽,防止鹽沉積。
定期檢查ShockPod電極觸點(diǎn),保持金屬導(dǎo)電面清潔。
避免使用高離子強(qiáng)度緩沖液進(jìn)行電擊,以防擊穿和電弧。
設(shè)備電源接地可靠,避免靜電積累造成內(nèi)部元件損壞。
在長期使用后可進(jìn)行校準(zhǔn)維護(hù),確保電容、電壓讀數(shù)精度。
Gene Pulser Xcell是一套靈活、精準(zhǔn)、安全的電穿孔系統(tǒng),特別適合在細(xì)胞工程、轉(zhuǎn)基因構(gòu)建、合成生物學(xué)等前沿研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。它結(jié)合了現(xiàn)代電穿孔技術(shù)中的核心優(yōu)勢:高壓控制精度、脈沖類型多樣、參數(shù)設(shè)置靈活與高度模塊化設(shè)計(jì),能夠?yàn)楦黝愌芯刻峁?biāo)準(zhǔn)化、可重復(fù)的轉(zhuǎn)染平臺。
對于正在尋找一套高效能、易操作、穩(wěn)定性強(qiáng)的穿孔系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室而言,Gene Pulser Xcell無疑是一款值得投資的設(shè)備。如果實(shí)驗(yàn)中存在對穿孔強(qiáng)度控制、脈沖時間精細(xì)調(diào)節(jié)或細(xì)胞類型跨度大的需求,這款設(shè)備的表現(xiàn)足以勝任。
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