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伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款高性能的基因導入與電轉化設備，用于細菌、酵母、植物原生質體及真核細胞的電穿孔實驗。該儀器通過瞬間高壓脈沖作用于細胞膜，使膜結構產生可逆性微孔，從而實現外源 DNA、RNA 或蛋白質的導入。
設備具備高精度的電壓控制、可調波形輸出、自動檢測與數據記錄功能，適合科研實驗室、醫藥研發機構及教學單位使用。其操作簡便、重復性高、安全防護完善，是分子生物學實驗中常用的關鍵儀器之一。
電穿孔的基本原理是利用高壓脈沖在細胞膜上產生電場梯度，使細胞膜局部破裂形成可逆微孔。當外源分子處于電場中時，在電驅動作用下進入細胞。隨后，電場移除，細胞膜自然修復，外源分子留存在細胞內，實現轉染或轉化。
伯樂電穿孔儀 165-2660 采用高壓儲能電容與高速放電開關技術，通過控制放電電壓、電容容量、脈沖時間等參數實現不同類型的電場波形，包括指數衰減波和方波兩種主要模式。
主機負責控制電壓輸出、參數設定與能量管理。內置微處理系統可進行自動檢測與數據存儲。
用于放置電擊杯并傳遞高壓脈沖信號。內置安全閉鎖系統，當蓋未閉合時，儀器無法執行放電。
用于擴展放電電容值，適合指數衰減波操作，可調整時間常數與能量釋放速率。
控制方波輸出、電阻負載與脈沖次數，適用于真核細胞或多脈沖實驗。
三種規格：0.1 cm、0.2 cm 和 0.4 cm，用于不同細胞類型。杯體采用絕緣塑料，電極鍍金處理，導電均勻且抗腐蝕。
環境溫度保持在 20–25 ℃，濕度 ≤ 80%。
使用獨立接地插座，電源電壓為 220 V ±10%。
工作臺干燥、防震、遠離金屬導體與易燃物。
保證儀器后方通風良好，不可堵塞散熱口。
檢查電源線及高壓線纜是否完好。
確認 ShockPod 蓋鎖結構正常。
檢查電擊杯無裂紋與液體殘留。
模塊插入牢固，主機處于“OFF”狀態。
打開電源后進行自檢，屏幕顯示 “READY” 方可操作。
選取對數生長期的細胞，活性高、狀態良好。
用低離子強度緩沖液洗滌 2–3 次，去除培養基中的鹽分。
調整細胞濃度至 1×10?–1×10? cells/mL。
將 DNA、RNA 或質粒溶液加入細胞懸液中，輕輕混勻。
將混合液預冷 5 分鐘，以降低電擊熱效應。
將主機置于平穩臺面。
插入 ShockPod 電擊槽至前端接口并鎖定。
若使用 CE 或 PC 模塊，在斷電狀態下插入后端擴展接口。
連接電源線并接地。
打開電源開關，待儀器完成自檢。
設備自檢內容包括電源穩定性、電壓模塊功能、溫度狀態和接口檢測。若屏幕出現錯誤提示，應立即斷電檢查。
開機后主界面顯示三種模式選項：
Preset Protocol（預設程序）：系統內置常見細胞類型參數。
Manual Setup（手動設置）：用戶可自定義電壓、電容、電阻、波形等。
User Program（用戶程序）：調用或保存自定義參數。
通過方向鍵選擇模式后按 “ENTER” 進入設置界面。
兩種可選波形：
指數衰減波（Exponential Decay）：適用于細菌、酵母、植物原生質體。
方波（Square Wave）：適用于哺乳動物細胞及多脈沖轉染。
電壓范圍：10–3000 V。
調整步進：1 V。
常見設定：
細菌：1800–2500 V
酵母：1000–1500 V
哺乳動物細胞：300–800 V
通過上下鍵調節后按 “ENTER” 確認。
| 參數 | 范圍 | 功能說明 |
|---|---|---|
| 電容 | 25–3275 μF | 決定能量儲存與衰減速度 |
| 電阻 | 50–1000 Ω 或 ∞ | 控制放電速度及波形平滑度 |
| 脈沖時間 | 0.05–10 ms | 方波持續時間，可多次疊加 |
對于多脈沖模式，可設置脈沖次數（1–10 次）及間隔時間（1–10 秒）。
設定完成后可按 “SAVE” 保存為用戶程序，系統自動分配編號。可隨時通過 “LOAD” 調用歷史參數。
將樣品 100–400 μL 加入電擊杯中。
檢查液面平整、無氣泡。
將電擊杯水平放入 ShockPod 電擊槽。
蓋上安全蓋，等待屏幕顯示 “Cuvette Ready”。
按 “PULSE” 鍵進入充電狀態，系統提示 “CHARGING”。
當提示 “READY TO PULSE” 時，按確認鍵開始放電。
放電瞬間完成，屏幕顯示電壓曲線及時間常數。
放電后等待系統顯示 “COMPLETE”，再取出電擊杯。
注意：放電過程中嚴禁觸碰儀器及電擊槽，以防高壓傷害。
放電完成后立即將樣品轉移至恢復培養基中。
細菌恢復時間約 30 分鐘，哺乳動物細胞 1–2 小時。
若液體溢出，應及時擦拭 ShockPod 內壁并保持干燥。
放電結束后，儀器自動生成實驗數據：
輸出電壓
時間常數（τ）
樣品電阻
能量釋放百分比
數據可存儲在內部存儲區或導出至外部設備（USB 接口）。
建議用戶建立實驗記錄表，記錄樣品類型、參數設置及結果，以便優化條件。
關閉電源開關并拔下電源線。
等待 10 秒，確保電容完全放電。
用無離子水沖洗電擊杯，晾干備用。
檢查 ShockPod 是否有液體殘留，用干布擦拭。
用柔軟布擦拭儀器外殼，保持清潔。
覆蓋防塵罩，放置于干燥環境中。
| 問題 | 原因分析 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 電弧閃光 | 樣品含鹽或氣泡 | 更換緩沖液，去除氣泡 |
| 電壓無輸出 | 模塊連接松動 | 重新插緊模塊接口 |
| 屏幕無顯示 | 電源線或保險絲問題 | 檢查電源，必要時更換保險絲 |
| 樣品死亡率高 | 電壓過高或時間過長 | 降低參數重新實驗 |
| 轉化效率低 | 電壓不足或細胞狀態差 | 優化電壓與細胞濃度 |
| 模塊識別失敗 | 接口臟污或接觸不良 | 清潔插口重新連接 |
操作人員必須經過高壓設備使用培訓。
禁止在潮濕或導電表面上使用儀器。
放電過程中不得打開 ShockPod 蓋。
嚴禁使用破裂或污染的電擊杯。
電源線、接地線保持良好，禁止私自更換插頭。
若出現異味、煙霧或異常聲響，應立即斷電。
不得將金屬物體接觸儀器接口。
使用完畢后確認完全斷電再清潔。
溫度控制
電穿孔操作前可將樣品及電擊杯置于冰上預冷 5 分鐘，減少熱損傷。
緩沖液優化
使用低離子強度緩沖液（如無鈣無鎂 PBS 或專用 electroporation buffer）。
電壓梯度法
新細胞類型可從低電壓逐級提升，找到最佳條件。
重復性檢測
每種參數至少重復 3 次，以確保結果穩定。
數據分析
對比轉化效率與細胞存活率，確定最佳脈沖組合。
每次使用后清潔儀器表面與電擊槽。
定期檢查風扇運行是否正常。
每三個月進行一次電壓輸出校準。
定期清理模塊接口，防止灰塵積聚。
長期不使用時每月通電 5 分鐘以保持電容活性。
電擊杯建議使用 2–3 次后更換。
伯樂電穿孔儀 165-2660 由長沙實了個驗儀器制造有限公司生產，提供 三年質保，只換不修 服務。
在質保期內，如出現性能故障或輸出異常，可聯系廠家技術支持更換整機或模塊。
用戶不得自行拆機維修，避免失去質保資格。
若操作過程中發生電弧閃光，應立即停止實驗并斷電。
若液體進入設備內部，應拔掉插頭并用干布擦拭。
若人員觸電，應立刻切斷電源并實施急救。
若設備冒煙或發熱異常，使用二氧化碳滅火器，不可用水。
操作結束后，應填寫設備使用日志，記錄狀態與參數。
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