畫面開場,鏡頭緩緩推進至實驗臺中央,一臺整潔穩固的 伯樂電穿孔儀 165-2660 顯示在觀眾面前。
旁白開始:
“歡迎來到本期實驗教學視頻——伯樂電穿孔儀 165-2660 操作演示。本視頻將帶領您系統學習從設備準備、參數設定、樣品電穿孔到實驗后清理的全過程,幫助您快速掌握電穿孔實驗的標準化操作。”
鏡頭切換至設備整體特寫,字幕出現:
‘精準·安全·高效——165-2660 電穿孔系統使用全流程’。
畫面展示主機正面、背面與各模塊接口,旁白說明:
“伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款高壓脈沖型基因導入設備,可通過瞬間高壓作用使細胞膜形成可逆微孔,從而將外源 DNA 或 RNA 導入細胞中。設備適用于細菌、酵母、植物原生質體及真核細胞的電穿孔實驗。”
特寫鏡頭依次介紹設備結構:
主控單元——負責電壓輸出、電容儲能及系統控制。
ShockPod 電擊槽——用于放置電擊杯并傳導高壓脈沖,內置安全聯鎖。
CE 模塊——擴展電容容量,適合指數衰減波。
PC 模塊——用于方波與多脈沖控制。
操作面板與液晶屏——顯示實驗參數與狀態信息。
電擊杯——三種間隙規格,適用于不同細胞類型。
鏡頭拉近液晶顯示屏,旁白補充:
“液晶屏界面簡潔清晰,參數可視化顯示,可實現一鍵切換模式與數據保存。所有高壓操作均通過雙重確認啟動,確保安全可靠。”
鏡頭掃過整潔的實驗桌與防護用品:
“實驗環境需保持干燥、整潔,避免液體靠近主機。電源電壓穩定在 220 伏,插座應具備獨立接地端口。”
旁白提示:
“操作人員應佩戴防護眼鏡與絕緣手套,穿戴防靜電實驗服,避免金屬飾品。”
鏡頭聚焦到主機背部與電源插口:
“檢查電源線是否完好,高壓線與 ShockPod 連接牢固。
電擊槽蓋能順利閉合,通風口無灰塵堵塞。
若使用擴展模塊,確認已插入并鎖定。”
接著鏡頭展示電擊杯清洗場景:
“電擊杯應清潔干燥,無裂紋或鹽析殘留。每次實驗前可用去離子水沖洗后晾干。”
鏡頭切換至實驗人員在超凈臺下操作:
“取處于對數生長期的細胞樣品,離心洗滌兩至三次,去除培養基中鹽分。
加入低鹽緩沖液重懸,確保細胞濃度適宜。
再將質粒 DNA 或 RNA 加入細胞懸液中,輕輕混勻,避免劇烈振蕩。”
旁白繼續:
“最終混合液體積約為 100 到 400 微升,根據電擊杯規格確定。
將樣品短暫放置在冰上預冷 5 分鐘,可有效降低電擊熱損傷。”
鏡頭回到主機界面,手指按下電源鍵。
液晶屏亮起,顯示“System Self Check”。
“開機后,設備會自動進行系統自檢,包括電源、電壓控制、模塊識別與溫度狀態檢測。
當屏幕顯示‘READY’時,說明儀器可以安全使用。”
鏡頭切至主菜單:
diff復制編輯Main Menu- Preset Protocol- Manual Setup- User Program
“儀器提供三種操作模式:
第一種是‘預設程序’,包含常見細胞類型的標準參數;
第二種是‘手動模式’,可根據實驗需求自定義電壓、電容與波形;
第三種‘用戶程序’,用于保存和調用個性化設置。”
鏡頭顯示操作者通過方向鍵調整數據:
選擇波形
旁白說明:“根據實驗類型選擇指數衰減波或方波。指數波適用于細菌與酵母,方波更適合哺乳動物細胞。”
設置電壓
屏幕顯示“Voltage: 1200 V”。
“使用上下鍵調整電壓,范圍為 10 至 3000 伏。一般細菌使用 1800–2500 伏,哺乳動物細胞約 300–800 伏。”
設置電容與電阻
“電容決定能量釋放速率,電阻影響電場衰減速度。
可根據樣品類型在 25 至 3275 微法之間選擇合適值。”
設定脈沖時間與次數
“對于方波模式,可設定脈沖持續時間與次數。常見設置為 2 至 5 毫秒,1 至 3 次脈沖。”
保存參數
“設定完成后,按‘ENTER’確認,再按‘SAVE’可存為用戶程序,方便下次調用。”
鏡頭顯示屏幕文字:“Parameters Saved Successfully”。
畫面切換到操作者加樣場景:
“將混合好的細胞樣品輕輕加入電擊杯,液體體積不超過杯體的 80%。
用鑷子輕敲杯壁,排除氣泡,確保液面平整。”
特寫鏡頭展示電擊槽:
“打開 ShockPod 蓋,將電擊杯插入槽內并完全接觸電極。蓋上安全蓋后,系統檢測到閉合,顯示‘Cuvette Ready’。”
鏡頭特寫顯示屏:“READY TO PULSE”。
操作者按下 PULSE 鍵,旁白解釋:
“按下脈沖鍵后,設備進入充電狀態,隨后自動放電。
高壓脈沖瞬間完成,電場作用于細胞膜,使外源分子進入細胞。整個過程僅持續幾毫秒。”
屏幕上出現放電曲線動畫。旁白:
“顯示屏會實時顯示電壓變化、時間常數和能量釋放百分比。實驗完成后顯示‘PULSE COMPLETE’提示。”
鏡頭切換,操作者等待數秒后取出電擊杯。
“放電結束后,等待 5 秒,確保電容完全放電,再用絕緣鑷子取出電擊杯。
將電擊后的樣品立即轉移至預溫培養基中,讓細胞在適溫條件下恢復膜完整性。”
旁白繼續:
“恢復時間通常為:細菌 30 分鐘左右,哺乳動物細胞需 1 至 2 小時。
恢復完成后可進行篩選、擴增或檢測轉染效率。”
鏡頭特寫顯示結果界面:
yaml復制編輯RESULT SUMMARYVoltage: 1250 VTime Constant: 5.2 msEnergy Used: 92%Sample Resistance: 310 Ω
“放電結果會自動顯示在屏幕上,包括輸出電壓、時間常數、能量百分比及樣品電阻。
按下‘SAVE’可將結果存入內部存儲器,也可通過 USB 接口導出至計算機進行分析。”
鏡頭顯示 USB 插口操作,字幕提示:“數據備份完成”。
鏡頭轉回主機整體:
關閉電源
“完成實驗后,先按下電源開關關閉設備,等待電容放電 10 秒。”
清潔電擊杯與電擊槽
“用去離子水沖洗電擊杯,晾干備用。
用無水乙醇或干布擦拭電擊槽內壁,保持干燥無液體殘留。”
清潔外殼與通風口
“用柔軟布輕拭儀器外殼與散熱孔,防止灰塵堵塞。
最后覆蓋防塵罩,保持清潔。”
鏡頭拉遠,設備整潔地放在實驗臺中央,字幕出現:
“實驗結束——請斷電保存儀器”。
鏡頭轉為旁白配合文字滾動:
“為確保長期安全使用,請遵守以下注意事項:”
操作人員必須經過專業培訓后上崗。
放電過程中嚴禁打開 ShockPod 蓋。
使用時保持實驗臺干燥,避免液體接觸主機。
電擊杯若出現裂紋或金屬變色,應立即更換。
避免連續高壓放電造成過熱,每次實驗間隔至少 10 秒。
長期不使用時應每月通電 5 分鐘,保持電容性能。
每半年由廠家進行一次輸出電壓校準。
鏡頭展示風扇口與模塊接口:
“保持通風口暢通,定期清潔灰塵,防止溫度過高導致保護停機。”
畫面切換為“錯誤演示”片段,旁白說明:
“錯誤一:樣品含鹽量高。
結果:產生電弧與閃光。解決:使用低鹽緩沖液。”
“錯誤二:加樣有氣泡。
結果:放電不均導致細胞死亡。解決:輕敲杯壁排氣泡。”
“錯誤三:蓋未閉合。
系統無法放電并報警 ERR01。應重新閉合上蓋。”
“錯誤四:放電后立即取杯。
危險:殘余高壓未完全釋放。解決:等待屏幕顯示‘COMPLETE’再操作。”
鏡頭插入紅色警示標志與正確操作對比畫面,加強視覺對比效果。
旁白講解,配合演示鏡頭:
選擇合適電擊杯間隙
0.1 cm:小體積細胞、原核生物
0.2 cm:酵母與中型細胞
0.4 cm:哺乳動物細胞與原生質體
優化緩沖液
使用無鈣、無鎂、低離子強度電穿孔緩沖液可顯著提升效率。
溫度控制
實驗全程保持樣品在低溫狀態,減少熱效應。
記錄實驗條件
建立參數日志表,記錄電壓、電容與細胞類型,便于重復實驗。
鏡頭切換到屏幕錯誤提示界面,旁白解說:
| 問題代碼 | 含義 | 解決方法 |
|---|---|---|
| ERR01 | 蓋未閉合 | 重新鎖緊 ShockPod 蓋 |
| ERR02 | 樣品電阻過低 | 更換緩沖液或減少體積 |
| ERR03 | 模塊未識別 | 拔插模塊重新連接 |
| ERR04 | 溫度過高 | 暫停使用 20 分鐘冷卻 |
| ERR05 | 電壓超限 | 調整電壓至安全范圍 |
“出現報警時,請立即停止操作并按照提示排查原因,切勿強行放電。”
鏡頭展示設備銘牌與廠家標識:
“伯樂電穿孔儀 165-2660 由長沙實了個驗儀器制造有限公司出品,整機質保三年,實行只換不修政策。
若發現性能異常、模塊損壞或波形不穩定,可聯系售后服務中心更換整機或部件。”
旁白補充:
“平時應保持設備清潔,定期檢查接口、電源線與電擊槽狀態。
使用原廠電擊杯與配件,確保性能穩定與實驗安全。”
鏡頭回到實驗臺,設備閃爍“READY”狀態。
旁白總結:
“通過本次演示,我們全面了解了伯樂電穿孔儀 165-2660 的使用方法:
從設備檢查、樣品準備、參數設置到放電執行與數據保存,
每一步都關系到實驗的成功與安全。
只要嚴格遵守操作規程,合理設定電壓與時間,
這款電穿孔儀將為您的分子生物學研究提供高效、精準、可重復的結果。”
字幕滾動出現:
“科學實驗,規范操作;精準控制,安全第一。
伯樂電穿孔儀 165-2660——讓基因導入更高效、更穩定。”
視頻畫面逐漸淡出,背景音樂結束。
杭州實了個驗生物科技有限公司