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質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司。
Bio-Rad GenePulser Xcell 電穿孔儀是一款高性能的基因導入系統，能夠在短時間內對細胞施加強電場，使細胞膜暫時形成可滲透通道，讓 DNA、RNA 或蛋白質等外源分子進入細胞。該系統模塊化設計靈活，操作簡便，廣泛應用于哺乳動物細胞、細菌、酵母、真菌以及植物原生質體的電轉化實驗中。
設備配備主機單元、ShockPod 電擊腔、CE 電容擴展模塊和 PC 電阻控制模塊，可實現不同波形（指數衰減波和方波）輸出，滿足多種實驗需求。儀器具備精準電壓控制、電弧保護和數據存儲功能，確保實驗的重復性與安全性。
為了幫助操作者高效掌握 GenePulser Xcell 的使用方法，以下對實驗全過程進行詳細說明，包括實驗準備、參數設定、電擊操作、樣品恢復及數據記錄等步驟。
在實驗前，確認主機、電擊腔和模塊連接穩固。檢查高壓線纜是否老化，確保接地良好。儀器應置于平穩干燥的實驗臺上，避免靠近水源或電磁干擾設備。
通電前確認電源電壓與儀器額定電壓一致，開機后待系統自檢完成方可操作。
準備新鮮健康的細胞樣品、無菌比色皿（0.1、0.2 或 0.4 cm 間隙）、低導電電穿孔緩沖液、移液槍與無菌槍頭。
質粒或核酸樣品應純度高、無鹽離子殘留。實驗前將所有液體與比色皿預冷至 4 ℃，以減輕電擊造成的熱損傷。
細胞的生理狀態決定電穿孔效果。
哺乳動物細胞：選擇對數生長期的貼壁或懸浮細胞，轉入前以 1×PBS 洗滌兩次，去除血清離子。濃度控制在 5×10?–1×10? 個/mL。
細菌：使用電感受態細胞，OD??? 在 0.5–0.7 之間，洗滌后懸浮于無鹽緩沖液。
酵母或真菌：用低離子緩沖液清洗數次以去除培養基殘留。
根據細胞類型選擇合適間隙：
0.1 cm：適用于細菌；
0.2 cm：適用于酵母；
0.4 cm：適用于哺乳動物細胞。
加入樣品時要緩慢注入，避免氣泡產生。氣泡是電弧的主要誘因，可能導致樣品燒毀。
插上電源，打開主機。系統自檢完成后進入主界面。確認 ShockPod 蓋子關閉良好，顯示屏顯示 “Ready” 狀態。
GenePulser Xcell 提供三種操作模式：
手動模式（Manual）：適合自定義實驗參數。
預設程序模式（Preset Protocol）：內置多種細胞類型參數，可快速調用。
用戶程序模式（User Protocol）：可儲存常用參數供重復實驗使用。
選擇相應模式后，確認連接的模塊類型，如 CE 模塊或 PC 模塊，以便系統正確識別控制參數。
不同模式下的參數略有差別，但核心包括以下幾項：
決定電場強度。E=V/d，其中 d 為比色皿間隙。
哺乳動物細胞一般設置在 100–300 V，細菌可達 1800–2500 V。
應根據細胞耐受性逐步優化，避免一次設置過高。
在指數衰減波模式中，電容控制放電能量和持續時間。
低電容（25–125 μF）產生短脈沖，適合細菌；高電容（500–1000 μF）產生長脈沖，適用于真核細胞。
時間常數 τ=RC，可直接顯示在儀器結果界面。
方波模式下設定脈沖時間（0.05–100 ms）與次數（1–10 次）。
難轉染細胞可適度增加脈沖數或時間，但應注意存活率。
多脈沖間需設定間隔 0.1–10 s。時間過短會導致細胞尚未恢復再次受擊而死亡。
若使用 PC 模塊，可增加并聯電阻（50–1000 Ω）穩定輸出。樣品電阻過低時必須調整以防短路。
準備好的細胞懸液與核酸混合均勻后，吸入比色皿中。
每次加入體積應略小于比色皿容量（如 0.4 cm 比色皿加樣 250 μL 左右）。
輕輕敲擊比色皿壁使氣泡浮出并移除。
將比色皿放入電擊腔底部凹槽，確保電極端完全接觸金屬接點。蓋緊 ShockPod 上蓋。
檢查顯示屏上參數無誤后，按下 “Pulse” 按鈕。系統發出提示音后立即執行電擊。
電擊時間通常為幾毫秒到幾十毫秒，結束后儀器顯示實際電壓、電流及時間常數。
電擊期間禁止觸摸儀器及樣品。若出現異常響聲或放電閃光，應立即停止操作。
電擊結束后，等待顯示屏恢復 “Ready” 狀態，再打開 ShockPod 蓋子。
取出比色皿，迅速將樣品轉入預冷復蘇液或培養基中。
電擊后細胞膜短暫開放，應立即處理以促進修復。
電擊后立即加入適量含血清培養基，靜置 5–10 分鐘以恢復膜完整性，再轉入培養皿培養。
過早離心或更換培養基會增加死亡率。
加入 800 μL 復蘇液（SOC 或 SOB），在 37 ℃ 振蕩 1 小時以表達抗性基因。
隨后可用于涂板篩選。
電擊后將細胞轉入富含營養的復蘇培養基中，30 ℃ 下靜置 1–2 小時，再進行篩選或培養。
電擊結束后，儀器自動顯示輸出電壓、時間常數、電流峰值等信息。
這些數據反映了放電過程的真實情況，應記錄保存以便優化實驗。
GenePulser Xcell 可自動保存最近 100 次實驗記錄。
建議定期導出數據至電腦或記錄本中，包括：
實驗日期
樣品類型
電壓、電容、電阻、時間常數
實際電流與脈沖圖形
轉染效率與存活率評價
通過多次實驗比較不同條件下的結果，繪制電壓—轉染率或時間—存活率曲線。
選擇兼顧高效率與高存活的參數作為標準條件。
儀器最高輸出達 3,000 V。操作時應保證手部干燥，不得觸碰電擊腔。
僅在 ShockPod 蓋子關閉時方可電擊，嚴禁裸露比色皿通電。
確保樣品中無氣泡、電極清潔、比色皿無裂紋。
緩沖液導電性適中，不含高濃度鹽。實驗前樣品充分冷卻可降低風險。
所有耗材必須無菌處理。操作臺表面用 70% 乙醇擦拭，防止交叉污染。
實驗后廢液需按生物危害廢棄物處理。
出現電弧或火花：
可能因氣泡、電極臟、樣品導電性過高。應重新制備樣品、清潔比色皿或降低鹽濃度。
轉染效率低：
可能電場強度不足或電擊時間太短。適度提高電壓或延長脈沖。
細胞死亡率高：
電壓過高或多脈沖間隔過短。應減小電場強度或增加間隔時間。
無電擊反應：
可能比色皿未接觸接點或模塊未識別。檢查 ShockPod 安裝與模塊連接。
結果重復性差：
樣品電阻波動大、溫度不穩定或緩沖液濃度不一致。建議統一制備體系并保持低溫操作。
關閉電源并拔掉插頭。
用軟布蘸去離子水清潔機身與電擊腔表面。避免液體流入插口。
使用后立即用去離子水沖洗比色皿，晾干保存。若電極發黑可用無水乙醇輕擦。
嚴禁使用酸性溶液清洗，以防腐蝕。
每月檢查一次 CE 與 PC 模塊接口是否牢固。長期使用后建議半年進行一次全面校準。
若發現輸出電壓偏差或電流異常，應停止使用并聯系廠家檢測。
實驗完成后，應及時整理數據并撰寫實驗報告，內容包括：
細胞類型與批次
樣品電阻與電導率
各參數設定值與實際輸出值
轉染效率統計結果
異常現象與原因分析
后續改進建議
標準化的數據記錄有助于提高實驗可重復性，也能在不同批次間實現條件比對。
GenePulser Xcell 電穿孔儀由長沙實了個驗儀器制造有限公司生產，整機質保三年，實行“只換不修”的服務政策。
使用過程中若出現非人為損壞的性能故障，廠家提供免費更換設備。所有配件均符合國家計量與安全標準。
用戶在購買后應妥善保存合格證與發票，以便質保期內享受換機服務。
GenePulser Xcell 電穿孔儀實驗流程從樣品準備到電擊操作，每一步都影響最終結果。成功的關鍵在于：
嚴格控制細胞狀態與緩沖體系；
消除氣泡與電弧隱患；
精確設定電壓、電容、時間常數等參數；
保證安全操作與充分復蘇；
規范記錄、分析與維護。
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