伯樂電穿孔儀 165-2661 是一款高精度、高穩(wěn)定性的生物電穿孔系統(tǒng),專為分子生物學、細胞工程、基因編輯和藥物研究等實驗設(shè)計。
它通過在短時間內(nèi)產(chǎn)生可控的高壓脈沖電場,使細胞膜暫時性電穿孔,從而實現(xiàn)外源性 DNA、RNA、蛋白質(zhì)或其他分子的導(dǎo)入。
與化學轉(zhuǎn)染或病毒載體等傳統(tǒng)方法相比,電穿孔技術(shù)具有以下顯著優(yōu)勢:
不依賴載體系統(tǒng),避免生物安全風險;
適用范圍廣,可用于細菌、真核細胞、植物原生質(zhì)體等多種體系;
轉(zhuǎn)化效率高,操作時間短;
對細胞類型適應(yīng)性強,可調(diào)整參數(shù)實現(xiàn)個性化導(dǎo)入。
伯樂 165-2661 采用高精度電壓控制、智能時間常數(shù)調(diào)節(jié)與雙波形放電系統(tǒng),能在不同實驗體系下保持能量釋放穩(wěn)定、細胞損傷最小,為科研人員提供標準化、高重復(fù)性的電轉(zhuǎn)化平臺。
在電穿孔實驗中,儀器施加的瞬時高壓電場會改變細胞膜的電勢分布。
當跨膜電位差超過 1.0–1.5 V 時,膜的磷脂雙層結(jié)構(gòu)被暫時破壞,形成納米級可逆孔道。
外源分子通過這些孔道進入細胞內(nèi)部,電場撤除后,膜結(jié)構(gòu)重新恢復(fù),細胞保持活性。
這一過程被稱為 可逆電穿孔效應(yīng)。
影響穿孔效果的主要因素包括:
電場強度 (E = V/d) —— 控制孔道形成的數(shù)量和大小;
脈沖持續(xù)時間 (τ) —— 決定電場作用時間;
波形類型 —— 決定能量分布;
導(dǎo)電性與溫度 —— 影響能量傳遞效率。
165-2661 的精準控制系統(tǒng)可在這些變量之間實現(xiàn)動態(tài)平衡,使能量釋放與細胞耐受度匹配,從而獲得最佳轉(zhuǎn)化效率。
伯樂電穿孔儀 165-2661 可廣泛應(yīng)用于分子克隆、基因編輯、細胞轉(zhuǎn)染、藥物研究、蛋白表達及生物育種等領(lǐng)域。以下對其主要應(yīng)用進行詳細說明。
適用體系:細菌(E. coli、Bacillus subtilis 等)
實驗?zāi)康?/strong>:實現(xiàn)外源質(zhì)粒 DNA 的高效導(dǎo)入,為基因克隆與蛋白表達奠定基礎(chǔ)。
典型參數(shù)設(shè)置:
電壓:1800–2500 V
電容:25 μF
電極間距:0.2 cm
波形:指數(shù)衰減波
τ 值:約 4.5 ms
應(yīng)用說明:
165-2661 在細菌體系中表現(xiàn)出優(yōu)異的重復(fù)性與轉(zhuǎn)化效率。
由于其放電時間精確可控,可有效避免電弧放電,提高樣品安全性。
轉(zhuǎn)化后的菌株用于后續(xù)基因克隆、突變分析或重組蛋白表達,是分子生物學實驗室中應(yīng)用最廣泛的領(lǐng)域之一。
適用體系:酵母(Saccharomyces cerevisiae、Pichia pastoris)
實驗?zāi)康?/strong>:導(dǎo)入線性 DNA、質(zhì)粒載體或外源基因,用于遺傳工程或代謝工程研究。
典型參數(shù)設(shè)置:
電壓:1200–1600 V
電容:500 μF
波形:指數(shù)波
脈沖次數(shù):2
間隔:1.0 s
應(yīng)用說明:
酵母細胞壁較厚,需適度提高電容延長能量作用時間。
165-2661 的自動電阻匹配系統(tǒng)可根據(jù)樣品導(dǎo)電率調(diào)整時間常數(shù),使細胞穿孔均勻且可逆。
常用于重組蛋白表達、代謝通路改造、CRISPR 基因敲除等研究。
適用體系:CHO、HEK293、NIH3T3 等動物細胞
實驗?zāi)康?/strong>:實現(xiàn)外源 DNA、mRNA 或 siRNA 的導(dǎo)入,用于基因表達調(diào)控、藥物篩選與信號通路研究。
典型參數(shù)設(shè)置:
電壓:400–800 V
電容:800 μF
波形:方波
脈沖次數(shù):2
間隔:1.0 s
時間常數(shù):7–8 ms
應(yīng)用說明:
方波模式能在較低電壓下維持穩(wěn)定電場,有助于維持細胞活性。
165-2661 通過精確電壓調(diào)節(jié)和能量補償機制,確保電場均勻分布,避免局部過熱。
廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究、基因治療載體開發(fā)及細胞信號通路實驗。
適用體系:植物原生質(zhì)體、藻類細胞
實驗?zāi)康?/strong>:導(dǎo)入外源基因、mRNA 或蛋白質(zhì),用于植物分子育種、基因編輯與功能驗證。
典型參數(shù)設(shè)置:
電壓:600–900 V
電容:1000 μF
波形:方波
脈沖次數(shù):3
間隔:0.8 s
τ 值:約 8–9 ms
應(yīng)用說明:
植物原生質(zhì)體無細胞壁,對電場較敏感。
165-2661 的多脈沖功能可實現(xiàn)逐步能量施加,促進基因?qū)胪瑫r保護膜完整性。
適用于基因功能研究、CRISPR/Cas9 系統(tǒng)遞送和農(nóng)作物基因改良實驗。
適用體系:哺乳動物細胞
實驗?zāi)康?/strong>:將 siRNA、miRNA 或 mRNA 導(dǎo)入細胞,實現(xiàn)基因沉默或瞬時表達。
典型參數(shù):
電壓:500–650 V
電容:600–800 μF
波形:方波
脈沖次數(shù):2
間隔:1 s
應(yīng)用說明:
電穿孔法相比脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,能有效導(dǎo)入大分子 RNA,不受細胞狀態(tài)和培養(yǎng)條件影響。
165-2661 可穩(wěn)定保持電場強度和時間常數(shù),使 RNA 導(dǎo)入均一且細胞活性高。
常用于基因功能研究、蛋白瞬時表達及信號調(diào)控分析。
適用體系:動物細胞、植物細胞、真菌細胞
實驗?zāi)康?/strong>:通過電場誘導(dǎo)膜融合,獲得雜交細胞或多核細胞,用于抗體工程或細胞生物學研究。
典型參數(shù):
預(yù)處理電場:低電壓(100–200 V/cm)使細胞對齊;
融合電場:高電壓脈沖(800–1200 V/cm)觸發(fā)融合;
波形:方波;
脈沖持續(xù)時間:20–40 μs。
應(yīng)用說明:
165-2661 的精確時間控制和多波形輸出特性使其可在融合階段穩(wěn)定產(chǎn)生短時強脈沖,促進細胞膜接觸與融合。
常用于制備雜交瘤細胞、抗體產(chǎn)生細胞系及植物體細胞雜交。
適用體系:動物細胞、腫瘤細胞、細胞模型體系
實驗?zāi)康?/strong>:利用電場促進納米藥物、載體或藥物分子進入細胞內(nèi)部,實現(xiàn)高效給藥與藥理研究。
典型參數(shù):
電壓:300–700 V
電容:800 μF
波形:方波
脈沖次數(shù):1–3
間隔:1 s
應(yīng)用說明:
165-2661 可精確控制能量釋放速率,防止藥物分子因過熱失活。
在藥理學、腫瘤電化學治療(ECT)及藥物載體系統(tǒng)優(yōu)化中有重要應(yīng)用價值。
165-2661 內(nèi)置數(shù)據(jù)采集系統(tǒng),可實時記錄電壓、電流、時間常數(shù)、能量釋放率及溫度信息。
用戶可通過 USB 導(dǎo)出數(shù)據(jù)文件,進行以下分析:
電壓-時間曲線分析:評估放電穩(wěn)定性;
τ 值統(tǒng)計:判斷不同導(dǎo)電體系下的能量衰減趨勢;
轉(zhuǎn)化效率計算:結(jié)合菌落形成或熒光強度測定結(jié)果,量化轉(zhuǎn)化效果;
存活率評估:通過細胞計數(shù)或活性染色評估電場作用后的細胞狀態(tài)。
這些數(shù)據(jù)有助于建立電穿孔的經(jīng)驗數(shù)據(jù)庫,為后續(xù)實驗提供可靠的參數(shù)優(yōu)化參考。
伯樂電穿孔儀 165-2661 在實驗應(yīng)用中表現(xiàn)出以下技術(shù)優(yōu)勢:
高精度能量控制
輸出電壓誤差 ≤ ±1%,時間常數(shù)精度 ±0.05 ms,確保實驗可重復(fù)性。
自動電阻匹配
根據(jù)樣品導(dǎo)電率自動調(diào)整放電回路,防止能量過度釋放。
雙波形輸出
可在指數(shù)波與方波之間自由切換,適配不同生物體系。
多脈沖運行模式
可設(shè) 1–10 次放電,支持復(fù)雜體系下的能量分級作用。
數(shù)據(jù)追溯系統(tǒng)
自動保存每次實驗的電擊參數(shù)與波形數(shù)據(jù),便于分析。
高安全性設(shè)計
具備蓋鎖保護、自動放電、過溫報警、接地檢測等多重防護機制。
適應(yīng)范圍廣
從原核生物到真核細胞,從單細胞到多細胞體系均可使用。
隨著生物技術(shù)和納米醫(yī)學的發(fā)展,165-2661 的電穿孔技術(shù)正向多方向拓展:
CRISPR/Cas 基因編輯系統(tǒng)遞送
可高效導(dǎo)入 Cas9 mRNA 和 sgRNA,實現(xiàn)精確基因敲除。
細胞免疫治療研究
用于 CAR-T、TCR-T 細胞的基因修飾與抗原呈遞優(yōu)化。
疫苗與核酸藥物開發(fā)
通過電穿孔實現(xiàn) DNA 疫苗或 mRNA 藥物的細胞內(nèi)導(dǎo)入驗證。
合成生物學研究
用于人工代謝通路重建與底盤細胞改造。
電化學與生物物理研究
用于研究細胞膜電特性、離子通道響應(yīng)及能量傳導(dǎo)機制。
多細胞組織電穿孔應(yīng)用
配合電針或電極陣列,可用于體外組織片段或類器官的基因?qū)胙芯俊?/span>
為了保證實驗效果,建議遵循以下優(yōu)化原則:
控制導(dǎo)電率:緩沖液導(dǎo)電率應(yīng)低于 1.5 mS/cm;
預(yù)冷操作:樣品、電擊杯與 ShockPod 預(yù)冷可減少熱損傷;
分步調(diào)整電壓:從推薦值的 80% 開始逐步增加;
監(jiān)測 τ 值:最佳范圍為 4–8 ms;
避免電弧:確保樣品無氣泡,液體體積占電擊杯 70–80%;
及時轉(zhuǎn)入恢復(fù)液:放電后 10 秒內(nèi)將細胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液修復(fù)。
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