伯樂(Bio-Rad)MicroPulser電穿孔儀(型號1652100) 的全面介紹,全文約3000字,分為以下六大部分:產品概述、核心技術與性能特點、適用范圍與細胞類型、操作流程與注意事項、常見問題與維護建議,以及與競品對比與選型建議。
伯樂(Bio-Rad)MicroPulser電穿孔儀1652100是一款專為微生物、酵母和哺乳動物細胞電轉化(電穿孔)設計的實驗室儀器。該設備通過精確控制電壓與脈沖時間,在細胞膜上瞬間形成孔隙,使外源DNA、RNA或其他大分子物質能夠進入細胞內部,從而實現基因轉染或其他分子生物學操作。
Bio-Rad作為全球知名的生命科學儀器制造商,其MicroPulser系列因操作簡便、性能穩定和適用性強,在全球眾多科研院所與生物技術公司中擁有廣泛的用戶基礎。
MicroPulser內置多種針對不同細胞類型的電穿孔程序,包括:
大腸桿菌(E. coli)
酵母菌(Yeast)
哺乳動物細胞(如CHO、293T等)
植物原生質體
每種預設程序都根據細胞膜的物理特性調配了合適的電壓、時間和波形參數,用戶也可自定義電壓與電阻值,以適應特殊實驗需求。
該儀器采用快速放電電容放電機制,在短時間內輸出高強度單個電壓脈沖,有效穿孔同時最大限度減少細胞損傷。其恒壓系統可精確輸出0.1kV至3.0kV的電壓,穩定性高,保證轉染效率的可重復性。
MicroPulser配備兼容Bio-Rad Gene Pulser/Micro Pulser Cuvette Holder的電極支架,可支持0.1cm與0.2cm間隙電穿孔杯,適合不同電場強度要求的實驗。此外,還支持標準1mm、2mm等規格的穿孔杯。
設備體積小巧(大約22cm x 20cm x 9cm),便于置于實驗臺角落或超凈工作臺內操作。前面板設有清晰的LCD顯示屏,提供參數設定與結果回讀功能,配合簡單按鍵控制,適合初學者與熟練科研人員使用。
伯樂MicroPulser廣泛適用于多種電穿孔實驗,主要包括:
大腸桿菌(常用于質粒轉化)
沙門氏菌、志賀菌等革蘭氏陰性菌
在常規條件下使用0.1 cm間隙電穿孔杯,電壓范圍通常在1.8kV~2.5kV之間。
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
念珠菌屬等
通常使用0.2 cm間隙電極杯,電壓控制在1.5kV左右。
CHO細胞、HEK293、Jurkat等懸浮或貼壁細胞
可用于RNA或質粒DNA的導入,適用于小規模實驗及驗證性轉染。
玉米、小麥、煙草原生質體的短時高壓脈沖電穿孔
需要特別優化的電壓與電容參數。
準備細胞與DNA溶液:將細胞洗滌并重懸于適當緩沖液(如sterile water、glycerol buffer)。
裝填穿孔杯:將細胞-質粒混合物轉移至預冷穿孔杯中(體積一般為50μL~100μL)。
插入電極座:將穿孔杯插入儀器配套電極支架。
設定參數并啟動穿孔:選擇細胞類型預設程序或手動設定脈沖電壓與時間。
處理后培養:立即將穿孔產物轉移至恢復培養基中,按實驗流程培養。
避免氣泡:穿孔液中存在氣泡會引發電弧放電,導致實驗失敗。
控制細胞濃度:過高或過低的細胞密度都會影響轉染效率與生存率。
電極杯需預冷:通常于4°C冰盒中冷卻,以減少熱效應對細胞的損傷。
嚴禁連續操作:高壓脈沖后設備需短時間冷卻,避免過熱影響壽命。
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
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電弧放電 | 杯中有氣泡或液體體積不足 | 檢查是否正確操作,重新加樣并排氣泡 |
無法啟動程序 | 電極座未插牢或接觸不良 | 重新插入并確認固定 |
轉染效率低 | 電壓設置不合適或細胞狀態不佳 | 優化參數或更換細胞批次 |
設備無響應 | 電源故障或保險絲燒毀 | 檢查電源連接,聯系廠家售后 |
每次使用后用70%酒精擦拭電極支架與外殼;
定期更換穿孔杯,避免重復使用影響實驗結果;
存放在干燥無腐蝕性氣體的環境中;
每年進行一次廠方推薦的性能檢測與校準。
品牌/型號 | 最大電壓 | 適用細胞 | 是否預設程序 | 價格區間 |
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Bio-Rad MicroPulser 1652100 | 3.0kV | 細菌/酵母/哺乳動物 | 有 | 中等 |
Invitrogen Neon Transfection | 2.3kV | 哺乳動物細胞專用 | 有 | 略高 |
Eppendorf Multiporator | 3.0kV | 多種細胞 | 有 | 高 |
BTX ECM399 | 2.5kV | 細菌/真核細胞 | 有 | 略低 |
如果你的實驗側重于細菌與酵母等微生物的高效轉化,同時需要一定程度的哺乳動物細胞適應性,Bio-Rad MicroPulser是一款性價比較高的通用選擇;
對于專注哺乳動物高效率基因編輯實驗,可考慮Neon等更高精度系統;
對預算有限、只進行基礎轉化操作的實驗室而言,MicroPulser具有操作簡便、壽命長、用戶評價高等優勢,適合作為入門或常規操作儀器。
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