羅氏(Roche)作為全球領先的生命科學與診斷企業,始終在分子診斷、基因檢測與個體化醫療領域保持創新優勢。自20世紀末PCR技術逐漸走向臨床和科研實驗室以來,羅氏率先推出了LightCycler系列實時定量PCR系統。LightCycler? 96是其中的經典機型之一,它憑借高穩定性、精準性和靈活性,成為全球科研院校、醫學實驗室以及制藥企業廣泛采用的核心分子檢測平臺。
LightCycler? 96是一款全自動化實時熒光定量PCR儀,支持多種熒光染料檢測通道,能夠在同一反應中實現基因擴增與定量檢測。該設備專為中等通量實驗需求而設計,單次可容納96個反應孔,既滿足科研的高效率,也適應臨床實驗室的常規工作量。
其設計理念突出以下三點:
快速循環:高效熱循環系統保證擴增過程穩定。
高靈敏檢測:優化的光學模塊提升熒光信號捕捉能力。
友好操作:軟件直觀,便于非專業人員上手。
LightCycler? 96的核心原理依然基于PCR的“變性—退火—延伸”三步循環過程。不同的是,它通過內置的光學檢測系統,實時監測擴增過程中熒光信號的變化,實現定量與定性分析。
支持的主要檢測模式包括:
絕對定量:通過標準曲線對靶標DNA或RNA進行拷貝數計算。
相對定量:比較目標基因與內參基因的表達差異。
基因分型:利用特異性探針進行SNP檢測。
熔解曲線分析:判斷擴增產物特異性,識別突變位點。
其光學模塊配備四個獨立通道,可支持多重檢測,大幅提升實驗效率。
溫控精度:
高性能銀塊加熱/冷卻系統,溫度精度可達±0.2℃。
均一性強,確保96孔板中所有樣品的同步性。
光學檢測:
LED光源與高靈敏度CCD相機結合,避免激發衰減問題。
支持FAM、HEX、ROX、Cy5等常見熒光染料。
通量與靈活性:
單次96反應孔,適合中等通量實驗室。
支持0.1 mL快速反應管和標準96孔板。
軟件功能:
自動生成標準曲線與Ct值分析。
提供一鍵式熔解曲線和基因分型結果。
云端數據存儲,便于團隊共享與遠程分析。
LightCycler? 96的操作界面高度直觀:
實驗設定:通過預置實驗模板快速建立方法,減少人工輸入。
運行過程:儀器全程自動化監控,實時顯示擴增曲線。
數據輸出:可導出Excel、PDF等多種報告格式,滿足科研和臨床需求。
此外,其體積緊湊,適合在空間有限的實驗室放置。維護簡便,僅需定期清潔光學模塊和校準。
LightCycler? 96在生命科學與醫學領域擁有廣泛應用:
臨床診斷
病原體核酸檢測(如新冠、流感、結核分枝桿菌等)。
遺傳病突變檢測與基因分型。
癌癥相關基因表達分析。
基礎科研
基因表達譜研究。
轉錄組學與RNA干擾實驗。
突變體篩查與功能基因驗證。
藥物研發
生物標志物篩選。
藥效學與毒理學評價。
農業與環境科學
轉基因作物檢測。
環境微生物群落分析。
與市場上其他同類PCR儀相比,LightCycler? 96的優勢主要體現在:
穩定性:銀塊熱循環系統優于常見的鋁塊,升降溫更均一。
多重通道:四色檢測支持更復雜的實驗設計。
軟件易用性:相比ABI、Bio-Rad等品牌,羅氏的軟件更直觀,學習成本低。
臨床轉化性:羅氏在體外診斷領域的強大背景,使其產品更適配臨床需求。
LightCycler? 96的數據分析基于嚴格的數學模型:
基線校正:自動排除早期背景噪音。
閾值設置:系統智能判定Ct值,避免人為偏差。
標準曲線擬合:保證擴增效率的準確計算。
結果可追溯性:軟件自動保存運行日志,符合GLP與ISO 13485標準。
這些功能確保結果具有高度可靠性,適合臨床溯源與科學發表。
羅氏為LightCycler? 96提供完整的售后支持:
安裝調試:專業工程師現場指導。
操作培訓:提供線上/線下培訓課程。
耗材與試劑:配套羅氏高品質PCR試劑,保證最佳兼容性。
遠程服務:軟件支持遠程診斷與維護,減少停機時間。
隨著個體化醫療和精準醫學的推進,實時熒光定量PCR儀正向高通量、自動化、智能化方向發展。未來的LightCycler系統可能在以下方面進一步突破:
更高通量:兼容384孔板甚至更大規模檢測。
人工智能分析:自動識別異常曲線,提升數據解讀效率。
自動化一體機:與樣品前處理、核酸提取、結果解讀無縫集成。
便攜化與現場檢測:適應公共衛生應急與現場監測需求。
羅氏LightCycler? 96實時熒光定量PCR儀以其精確的溫控、靈敏的檢測、便捷的軟件以及廣泛的應用,成為科研和臨床實驗室不可或缺的重要設備。它不僅保證了實驗結果的可靠性和可重復性,還為未來基因檢測和精準醫學奠定了堅實基礎。
在全球分子診斷需求不斷增長的背景下,LightCycler? 96憑借羅氏的品牌優勢與創新精神,必將在未來數十年繼續引領qPCR領域的發展。
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