熒光定量 PCR(Real-Time Quantitative PCR, qPCR)已經從 20 世紀末的實驗室新技術,發展為生命科學和臨床檢測的常規手段。它將 PCR 擴增與熒光信號檢測同步進行,能夠在每一循環實時監測反應過程,最終以定量方式輸出結果。
羅氏(Roche)的 LightCycler 系列 qPCR 儀在全球擁有廣泛的用戶基礎,以精確的溫控、優良的光學系統和直觀的操作軟件著稱。對于預算有限的實驗室,二手羅氏 qPCR 儀不僅能顯著降低購置成本,還能在性能上滿足絕大多數科研與檢測需求。特別是 LightCycler 480 II 與 LightCycler 96,二者覆蓋了從高通量到中等通量的多種應用場景,是二手市場的熱門型號。
羅氏熒光定量 PCR 儀的檢測核心,是將熒光信號與核酸擴增過程實時耦合:
擴增
樣品中的目標 DNA 或 cDNA 經由 PCR 反應,在熱循環系統的溫控下按設定的溫度曲線擴增。
熒光信號采集
熒光染料或探針在與擴增產物結合或被切割時釋放信號,光學檢測模塊在每一循環結束時進行激發與檢測。
曲線生成與分析
軟件將信號強度與循環數對應繪制擴增曲線,通過標準曲線法或 ΔΔCt 方法進行絕對或相對定量分析。
檢測方式可分為:
染料法(如 SYBR Green):經濟、易用,適合基因表達分析。
探針法(如 TaqMan、FRET 探針):特異性高,適合多重檢測與臨床診斷。
貨號:05015278001
通量:可使用 96 孔或 384 孔反應板,滿足大規模樣本處理需求。
溫控:升降溫速度快、均一性高,孔間差異極小,確保大通量實驗中的一致性。
光學系統:支持多波長檢測,可進行多重熒光實驗;濾光系統切換迅速,減少通道干擾。
應用定位:大型科研項目、臨床分子診斷、基因表達譜研究、高通量病原體篩查。
優勢:一次性處理樣本多,適合中心實驗室或需要批量檢測的單位。
貨號:05815916001
通量:固定 96 孔平臺,兼容標準 PCR 板或 8 聯管,靈活適配小批量實驗。
用戶界面:彩色觸屏+直觀圖形化菜單,新用戶也能快速掌握操作。
結構特點:體積小,桌面放置即可運行,維護簡便。
應用定位:中小型科研團隊、教學實驗室、常規分子檢測。
優勢:成本低、上手快、實驗室占地少。
二手羅氏 qPCR 儀對于預算有限但追求性能的實驗室來說,有以下價值:
顯著降低成本
新機價格通常在幾十萬元人民幣,而二手設備僅需其三分之一到一半的預算。
性能與耐用性
羅氏設備壽命長、核心部件耐用,只要維護得當,二手機依然能保持穩定表現。
備件與耗材易獲取
由于用戶基數大,耗材供應和第三方維修渠道豐富,維護成本低。
部署周期短
二手設備通常現貨供應,安裝調試后即可投入使用,無需漫長的交貨等待。
溫控精度
采用高精度半導體熱循環技術,溫度偏差可控制在 ±0.25°C 以內,保證 Ct 值穩定。
多重檢測能力
光學模塊可支持多達 6 種熒光通道,實現一管多靶標檢測,顯著提高效率。
信號靈敏度
檢測下限可低至單拷貝水平,適合低濃度樣本檢測。
軟件分析功能
從擴增曲線到熔解曲線,從相對定量到 SNP 分型,分析模塊完整且易用。
耐用結構設計
光學組件與熱循環模塊密封良好,減少灰塵和濕氣影響,延長使用壽命。
生命科學研究
基因表達定量分析
轉錄組驗證
拷貝數變異研究
臨床與公共衛生
病原體載量檢測(如流感病毒、SARS-CoV-2)
遺傳病基因突變篩查
腫瘤分子標志物分析
農業與食品安全
轉基因成分檢測
食源性致病菌檢測
動植物疫病監測
環境監測
水質微生物污染監測
病原體環境溯源調查
開機前檢查
確保樣品架、光學模塊干凈無塵,防止信號干擾。
耗材匹配
選用廠家推薦或兼容性驗證過的反應板、管、封膜,防止蒸發或漏液。
定期校準
每 6–12 個月進行一次溫控與光學校準,確保數據精度。
軟件維護
保持分析軟件版本更新,以獲取新功能和更好兼容性。
運輸與存儲
搬運時固定光學和熱循環模塊,存放在干燥恒溫環境。
無論是高通量的 LightCycler 480 II,還是靈活易用的 LightCycler 96,二手羅氏熒光定量 PCR 儀都能在合理預算內提供穩定可靠的分子檢測能力。前者適合中心實驗室和大規模篩查項目,后者更適合中小型實驗室的日常檢測與培訓應用。
在采購時,結合實驗需求、預算、樣本量與未來擴展方向進行選擇,再配合到位的驗機與維護流程,就能在不犧牲性能的前提下,實現檢測能力與成本控制的雙贏。
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