ABI 7500 實時熒光定量 PCR 儀(Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System)是由賽默飛世爾科技開發的一款廣泛應用于科研與臨床研究領域的標準型實時定量 PCR 儀器。自推出以來,該設備因其穩定性高、數據準確、功能實用而被全球眾多實驗室采用。它結合先進的熱控系統、可靠的熒光檢測模塊和成熟的軟件平臺,適用于基因表達分析、病原體檢測、遺傳分析等多種分子生物學應用。
無論是科研院校、醫院、疾病控制中心,還是食品藥品檢驗、農業檢測機構,ABI 7500 都是一款值得信賴的實時 PCR 平臺。特別是在二手設備市場上,其性價比優勢尤為明顯。
ABI 7500 擁有五色通道系統,支持多種熒光染料檢測,如 FAM、VIC、ROX、TAMRA 和 SYBR Green,兼容多重 PCR 檢測,能夠滿足用戶在復雜多靶點檢測方面的需求。熒光系統采用高效激發光源和濾光片組,確保信號識別靈敏,降低背景干擾,提升數據準確性。
儀器配備高性能帕爾貼熱循環模塊,可實現快速升降溫控制,溫控均一性優于 ±0.25°C,確保所有樣本孔的反應環境一致。該特性是實現高重復性結果的關鍵。
標準版本的 ABI 7500 反應程序大約需兩個小時完成一個運行周期。針對時間敏感場景,用戶也可選用 Fast 模塊升級(7500 Fast 系列),進一步壓縮反應時間至40分鐘左右。
ABI 7500 配套使用 SDS 軟件(System Detection Software),現多數實驗室已升級至 7500 v2.3 或兼容 QuantStudio 軟件。該軟件提供:
標準曲線定量分析
相對定量分析(ΔΔCt 方法)
熔解曲線分析
SNP 分型
CT 值自動判定及基線/閾值調整
曲線擬合、熒光圖形導出、報告生成
軟件操作邏輯清晰,支持模板保存、批量數據導出、圖像和數值一鍵導出等功能,是用戶數據分析的重要保障。
ABI 7500 使用標準的 96 孔光學板,適用于常規樣本通量分析,單次可處理 96 個反應體系,滿足大部分科研和檢測單位的需求。
通量支持:96孔標準光學反應板
熒光通道:5通道(FAM、VIC、ROX、SYBR Green、TAMRA)
光源系統:長壽命高強度氙燈(或 LED 版本視機型而定)
檢測器類型:高靈敏 CCD 攝像系統
升溫速度:約 2.5°C/秒(標準版)
反應體系體積:10–100 μL
熱控精度:±0.1°C
溫度均一性:≤ ±0.25°C(孔間差)
操作系統兼容:Windows 7、10
數據接口:USB、LAN、RS-232 串口
配合反轉錄 PCR(RT-PCR)技術,ABI 7500 可用于細胞或組織樣本中基因的表達量定量分析,適用于疾病機制研究、藥物篩選和表型研究。
其高靈敏度和通量適中特點,廣泛應用于病毒載量監測、細菌定量檢測及呼吸道病原核酸分析。例如,新冠病毒核酸檢測中,ABI 7500 常作為主力平臺。
通過 TaqMan 探針結合 SNP 分型方法,設備可實現個體基因型判別,是藥物代謝基因、腫瘤突變篩查等領域的重要工具。
可用于檢測轉基因成分、致病菌污染、生物毒素或動物源成分殘留,支持多靶點定量分析,符合監管標準。
在生物制藥與疫苗研發過程中,用于檢測表達載體穩定性、病毒純度、污染物排查等關鍵指標,是 GMP 環境下常見的核酸檢測平臺。
ABI 7500 是一款經久耐用的 PCR 平臺,許多型號在正確維護下可連續使用10年以上。選購二手設備時應重點關注以下幾個方面:
觀察設備外殼是否有裂痕、氧化或拆卸痕跡,樣品艙是否平整清潔。查看鍵盤、屏幕是否響應靈敏,指示燈狀態是否正常。
要求供應商提供溫控測試數據、校準報告和熒光通道測試曲線。檢查 CCD 相機是否可正常采集,激發燈壽命是否足夠。
確認設備是否附帶原版 SDS 軟件及授權密鑰,避免后續使用中出現功能限制。此外,檢查是否能兼容新版系統環境(如 Windows 10)。
包括樣本板架、熱蓋組件、電源線、USB線、出廠說明書等。若缺失關鍵組件,需估算額外采購成本。
優先選擇帶有專業檢修、質保期和售后支持的渠道供應商,確保故障時有渠道響應和技術處理。
樣品準備:配制反應體系,加入引物、探針、模板及 Master Mix,分裝至96孔板中。
封板與離心:用光學透明密封膜密封板口,短時離心去除氣泡。
上機操作:將板置入樣本托架,對準位置并關閉儀器蓋。
軟件設置:啟動 SDS 軟件,選擇反應通道、溫控程序、數據采集模式及樣本分組信息。
運行實驗:點擊啟動,系統自動執行熱循環程序并實時采集熒光信號。
數據分析:結束后通過軟件查看 CT 值、熒光擴增曲線、標準曲線、熔解曲線等,導出報告與結果文件。
清潔與關機:實驗結束后取出樣品板,清理樣品艙,關閉設備。
問題情況 | 可能原因 | 解決方案 |
---|---|---|
無熒光信號 | 探針失效、光源老化 | 更換探針,檢測燈泡壽命 |
Ct 值偏高或不一致 | 模板濃度低或反應體積不均 | 優化模板濃度,復查加樣方法 |
熔解曲線出現多峰 | 引物特異性差或有污染 | 優化引物設計、重新提取樣本 |
軟件閃退或卡頓 | 驅動不兼容或授權丟失 | 重新安裝軟件,確認系統環境 |
自動校準失敗 | 光學路徑或溫控故障 | 執行光學校準或聯系維修人員 |
設備型號 | 熒光通道 | 通量 | 特點描述 |
---|---|---|---|
ABI 7500 | 5通道 | 96孔 | 通用型設備,經典穩定,軟件成熟 |
QuantStudio 3 | 4通道 | 96孔 | 操作簡潔,適合教學與中小規模實驗室 |
QuantStudio 5 | 6通道 | 96孔 | 多染料支持強,云端管理 |
ViiA 7 | 6通道 | 96/384孔 | 高端科研與診斷平臺,適合高通量需求 |
ABI 7500 在性能與價格間取得平衡,適合多數實驗需求,是大批量標準檢測的理想設備。
ABI 7500 實時熒光定量 PCR 儀憑借其穩定的性能、成熟的軟件系統和強大的多功能支持,在分子生物學研究與應用中有著廣泛影響。即使在當今儀器更新迭代快速的背景下,它仍舊以可靠性和易用性贏得用戶青睞。
對于預算有限但希望搭建高效核酸檢測平臺的實驗室而言,選購一臺狀態良好、配件完整、經過校準的二手 ABI 7500,將是性價比極高的選擇。在規范使用和妥善維護下,它依然能夠長期穩定運行,助力科研與檢測工作的開展。
杭州實了個驗生物科技有限公司