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聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction, PCR）作為分子生物學中最為基礎且廣泛應用的技術之一，極大地推動了生命科學、醫學診斷、食品安全、法醫學等多個領域的發展。熒光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR, qPCR）是在傳統PCR技術基礎上發展而來的，其利用熒光信號的變化實時監測擴增過程，從而實現目標核酸的定量分析。伯樂（Bio-Rad）公司作為分子生物學領域的重要設備提供商，其推出的CFX系列熒光定量PCR儀因性能穩定、靈敏度高、操作便捷等特點，在全球眾多實驗室中得到了廣泛應用。
伯樂熒光定量PCR儀采用實時熒光信號檢測的方式，結合TaqMan探針或SYBR Green染料，通過每個循環中熒光強度的變化來動態反映DNA擴增的進程。
SYBR Green原理：SYBR Green I 是一種非特異性熒光染料，能嵌入雙鏈DNA（dsDNA）中，嵌入后發出強烈熒光。PCR反應中，產物量越多，熒光信號越強。
TaqMan探針法：該方法使用含有熒光基團和淬滅基團的寡核苷酸探針。在PCR擴增過程中，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針切斷，釋放熒光信號，實現高特異性檢測。
CFX系列PCR儀內置高靈敏度光學系統，可在每一循環結束時檢測熒光變化，從而生成擴增曲線，實現定量分析。
| 參數 | CFX96 Touch | CFX384 Touch |
|---|---|---|
| 樣本通量 | 96孔 | 384孔 |
| 熒光通道數 | 最多5通道 | 最多5通道 |
| 最快升溫速度 | 5°C/s | 4°C/s |
| 最快降溫速度 | 3.5°C/s | 3.5°C/s |
| 溫度均一性 | ±0.2°C | ±0.2°C |
| 靈敏度 | 可檢測單拷貝 | 可檢測單拷貝 |
| 操作界面 | 觸摸屏+軟件控制 | 觸摸屏+軟件控制 |
伯樂PCR儀配套使用CFX Maestro軟件，支持多重分析（multiplexing）、標準曲線法、相對/絕對定量、熔解曲線分析、基因表達分析等。
伯樂CFX系列配備Peltier溫控模塊，可實現快速升降溫、精準控溫，保證擴增效率與重復性。溫度均一性在±0.2°C以內，最大程度減少井間差異。
CFX系統采用獨立熒光通道，每通道配有專屬LED激發光源和濾光片組，避免串擾、提高檢測精度。靈敏度高，可實現單分子級別檢測。
可支持多達5種熒光染料（FAM、HEX/VIC、Texas Red、Cy5、Cy5.5等），適合進行多重qPCR反應，提高數據通量和實驗效率。
CFX Maestro軟件功能強大，支持以下功能：
Ct值自動計算與編輯；
標準曲線自動繪制；
表達量相對/絕對定量分析；
融解曲線分析判別產物特異性；
熱圖與聚類分析；
21 CFR Part 11合規選項，滿足臨床應用需求。
觸屏操作界面，支持USB、WiFi、LAN連接；
與伯樂的PCR耗材、通用塑料管、高透光密封膜完全兼容；
支持LIMS系統對接和遠程數據管理。
伯樂熒光定量PCR儀廣泛應用于基礎科研與臨床研究，包括但不限于以下幾個方向：
通過相對或絕對定量方法，可定量檢測mRNA或miRNA的表達水平，廣泛用于腫瘤學、發育生物學、植物抗性研究等領域。
使用特異性引物與探針，快速識別細菌、病毒、真菌等感染源，如HIV、HPV、SARS-CoV-2等，是臨床微生物檢測的核心工具。
結合探針法或HRM（高分辨熔解曲線）技術，檢測單核苷酸多態性（SNP）或點突變，應用于遺傳學研究與分子診斷。
檢測轉基因作物中特定外源基因（如35S啟動子、NOS終止子）是否存在，滿足食品安全檢測需求。
定量PCR在DNA指紋、親子鑒定、法醫學物證分析中具有廣泛應用，特別適合微量樣本分析。
在眾多qPCR品牌中（如ABI、Roche、Qiagen、Thermo Fisher），伯樂PCR儀具有如下優勢：
| 指標 | 伯樂（Bio-Rad） | ABI（Applied Biosystems） | Roche（LightCycler） |
|---|---|---|---|
| 價格 | 中等偏低 | 中等 | 偏高 |
| 通道串擾 | 極低 | 存在一定串擾 | 中等 |
| 操作界面 | 簡單直觀 | 相對復雜 | 中等 |
| 分析軟件 | CFX Maestro強大易用 | 需要額外安裝 | 功能全面但復雜 |
| 服務與耗材兼容性 | 極佳 | 中等 | 偏差大 |
在使用伯樂熒光定量PCR儀進行實驗時，應注意以下幾點，以保證數據質量和儀器壽命：
樣本制備規范化：核酸模板應純凈、無蛋白、無抑制劑，建議使用A260/A280在1.8~2.0之間的RNA或DNA。
封板質量控制：確保每個孔充分封膜，無氣泡，否則會導致光信號干擾或孔間污染。
避免光漂白：染料類熒光分子對強光敏感，應避免樣本長時間暴露于強光下。
定期校準儀器：伯樂公司提供光學校準與溫控校準標準模塊，應定期使用以保持檢測性能。
選擇合適的熒光染料與通道：根據熒光通道激發/發射波長匹配不同染料，確保信號無交叉干擾。
隨著高通量檢測需求的不斷增長以及分子診斷向POCT（即時檢測）方向發展，熒光定量PCR技術正朝以下方向演進：
便攜式微型qPCR設備：適用于現場檢測與疾病快速篩查；
數字PCR技術整合：提高定量精度，突破傳統Ct法限制；
AI數據分析與自動化工作站結合：提升大數據背景下的樣本處理與解讀效率；
多組學平臺整合：結合qPCR與測序、質譜等其他組學技術，推動精準醫學發展。
伯樂熒光定量PCR儀以其精準的溫控系統、高靈敏度的光學檢測模塊和靈活的分析軟件，已經成為現代分子生物學實驗中不可或缺的重要工具。其廣泛的應用領域和出色的性價比，使其在科研、醫療、農業等多個行業中擁有廣泛的用戶基礎。隨著分子技術的持續發展和檢測需求的不斷提升，伯樂PCR儀將在推動科學研究與臨床轉化方面發揮越來越重要的作用。
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