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熒光定量PCR（qPCR）是現代分子生物學實驗中最重要的技術之一，能夠實時監測核酸擴增過程，并進行定量分析。賽默飛（Thermo Fisher Scientific）作為全球知名的生命科學儀器制造商，旗下熒光定量PCR儀型號豐富，涵蓋了從科研到臨床、從常規應用到高通量需求的全系列產品。如何在眾多型號中選到最適合的設備，需要結合實驗需求、預算、實驗室條件及未來升級空間綜合考慮。
本文將從技術原理、關鍵性能參數、不同型號特點、選型步驟、應用場景匹配及注意事項等方面，為你提供一份全面的選購參考。
熒光定量PCR儀的核心是實時檢測體系中熒光信號的變化，并將其與擴增產物的數量建立對應關系，從而實現定量分析。賽默飛的儀器主要支持兩類熒光檢測模式：
非特異性染料法
以SYBR Green為代表，與雙鏈DNA結合后發出熒光。
成本低、操作簡便，但特異性較探針法低。
特異性探針法（TaqMan等）
利用熒光探針與目標序列的特異性結合，在擴增過程中通過酶切釋放熒光信號。
特異性高、可實現多重檢測。
賽默飛的qPCR儀普遍兼容這兩種模式，部分高端型號支持更多波長和通道，能夠同時檢測多個靶標。
在選型時，以下技術參數至關重要：
通道數（檢測波長數）
常見有4、5、6通道，部分高端型號支持多達8通道。
如果需要多重檢測（如病毒多位點檢測），建議≥5通道。
溫控系統精度與均一性
升降溫速度（如≥4℃/秒）、溫控精度（±0.25℃）和均一性決定了擴增效率與重復性。
金屬塊均勻加熱與先進的Peltier元件是高精度儀器的基礎。
樣本通量
從16孔迷你機到96孔、384孔超高通量，需根據實驗規模選擇。
高通量適合大型實驗室和臨床篩查，低通量更適合教學和科研小組。
光學檢測系統
激發與檢測方式（LED + 光電二極管或CCD攝像頭），影響靈敏度和背景噪聲。
獨立光路與濾光片切換系統可減少通道間干擾。
數據分析軟件
是否支持自動閾值設置、標準曲線建立、基因表達分析（ΔΔCt法）、熔解曲線分析等。
部分型號支持云端分析與LIMS系統對接。
易用性與維護
是否具備觸摸屏操作、USB數據導出、網絡連接等功能。
是否支持免維護光學系統、自動自檢功能。
根據應用層級，賽默飛的熒光定量PCR儀可大致分為三類：
入門級與便攜型
適合教學、小規模科研、現場檢測。
樣本通量一般為16–48孔，體積小，操作簡便。
標準科研型（96孔）
最常見，適合絕大多數基礎研究實驗室。
兼顧速度、通道數和價格，支持多種熒光檢測模式。
高通量與專業臨床型（384孔或多模塊）
面向臨床分子診斷、基因組學研究、大規模篩查。
可同時運行多個模塊，實現批量檢測與不同溫控條件并行。
在賽默飛的產品線中，典型的代表型號有：
QuantStudio系列：覆蓋從QuantStudio 3、5、6、7、12K Flex到Absolute Q等，適配不同通量與通道需求。
StepOne/StepOnePlus：經典型號，適合日?？蒲小?/p>
高端定制型號：支持數字PCR功能、全自動化集成。
明確實驗需求
是做相對定量還是絕對定量？需要多重檢測嗎？
樣本量是否大到需要高通量平臺？
評估預算與長期投入
除儀器購置成本，還需考慮耗材、探針、維護費用。
結合實驗室條件
場地大小、電源環境、網絡連接等是否匹配。
預留升級空間
如果未來可能增加多重檢測或數字PCR，建議選擇可擴展的型號。
關注售后與技術支持
是否提供本地化服務、培訓和快速維修。
基礎分子生物學研究
96孔4–5通道機型，如QuantStudio 3或5，性價比較高。
轉錄組或基因表達分析
需高通量和多通道，如QuantStudio 6或7，支持熔解曲線精確分析。
臨床分子診斷
需嚴格溫控、多通道、多模塊并行，推薦384孔或雙模塊型號。
現場檢測或教學
便攜式、低通量型號即可滿足，如小型StepOne機型。
兼容性：確認與現有試劑、耗材、探針的兼容性。
擴展性：有無升級為數字PCR的可能。
數據安全：臨床檢測需符合法規要求，數據可追溯。
環境適應性：溫濕度、供電穩定性等對精密設備的影響不可忽視。
選擇賽默飛熒光定量PCR儀并非單純比價格或比參數，而是要從實驗目標—預算—通量需求—可擴展性—服務保障幾個維度綜合考慮。對于多數科研用戶，中端96孔多通道機型能平衡性能與成本；對于大規模檢測和臨床診斷，高通量、多模塊的型號更具優勢；而對于現場檢測與教學，低通量、便攜型更合適。
合理的選型不僅能提升實驗效率與數據質量，還能在未來需求變化時保持靈活應對能力，從而保障科研與檢測工作的持續穩定運行。
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