——LightCycler 480 II 與 LightCycler 96
羅氏(Roche)在熒光定量 PCR(qPCR)領域具有豐富經驗,其 LightCycler 系列產品憑借穩定的溫控性能、精確的光學檢測系統和易用的軟件平臺,廣泛應用于分子生物學、遺傳學、醫學檢測、食品安全和環境監測等領域。對于預算有限或希望快速擴充檢測能力的實驗室來說,購買二手羅氏熒光定量 PCR 儀是一種性價比極高的選擇。
本文將詳細介紹兩款常見的二手羅氏 qPCR 機型——LightCycler 480 II(貨號:05015278001) 和 LightCycler 96(貨號:05815916001),包括其功能特點、適用場景、操作要點及使用建議。
貨號:05015278001
定位:高通量實時熒光定量 PCR 系統
適用場景:大規模樣品檢測、科研與臨床診斷、需要多板型適配的多領域實驗室。
高通量能力
可支持 96 孔、384 孔板型以及多種格式的反應管,單次運行可同時檢測數百個樣品,非常適合基因表達分析、大規模 SNP 分型、基因拷貝數檢測等需要高批量處理的實驗。
先進的光學系統
采用多通道光學檢測(常見為 5 色通道),可同時檢測多種熒光信號,實現多重 qPCR 分析。其光學均一性和靈敏度高,可有效降低孔間差異。
靈活的程序設計
用戶可根據實驗需求自定義溫度梯度、熒光采集點和循環次數,適配 SYBR Green、TaqMan、FRET 等多種檢測化學方案。
強大的數據分析功能
配套軟件提供絕對定量、相對定量、基因分型、熔解曲線分析等多種分析模塊,可自動生成標準曲線、計算 Ct 值、分析基因表達倍數變化。
溫控精準
升降溫速率高,溫度控制精度可達 ±0.1℃,確保擴增反應的重復性和可靠性。
基因表達分析:使用內參基因歸一化,分析目標基因的表達差異。
SNP 分型:通過熔解曲線或探針檢測進行基因型判定。
病原體檢測:適用于病毒、細菌等核酸檢測,包括臨床分子診斷。
轉基因檢測:可在食品或農作物中檢測轉基因序列。
樣品準備
確保反應體系配制準確無誤,模板純度高,反應管密封良好,避免蒸發。
光學模塊保養
定期清潔樣品槽和光學窗口,避免灰塵或樣品殘留影響熒光采集。
溫控系統維護
保證通風口暢通,長期不用時應封存防潮。
軟件熟練操作
學習使用其分析模塊,可顯著提高數據處理效率。
貨號:05815916001
定位:中等通量實時熒光定量 PCR 儀
適用場景:中小型實驗室、日常檢測、教學及常規科研任務。
操作簡便
采用直觀的圖形化界面,適合不同經驗水平的實驗人員快速上手。
配套軟件可直接引導用戶設置程序、分配樣品布局并自動生成結果。
通量適中
支持 96 孔板或常規 8 連管,既滿足日常檢測需求,又避免過高的運行成本。
多通道檢測
一般配備 4–5 色光學通道,兼容多種熒光探針和染料,可進行多重檢測。
穩定的溫控性能
溫度均一性高,孔間差異低于 ±0.2℃,確保重復性。
網絡化管理
支持數據聯網傳輸和遠程訪問,方便實驗室信息化管理和多點協作。
常規基因定量分析:如檢測目標基因在不同處理條件下的表達變化。
病原體快速篩查:在食品檢測、臨床快速檢測中應用廣泛。
教學與培訓:界面友好,便于在教學實驗中演示 qPCR 原理與操作流程。
快速上手
新手可使用默認程序模板,根據試劑說明調整退火溫度和循環次數。
數據安全
建議定期備份數據文件,并妥善保存板布局文件以便重復分析。
維護習慣
實驗結束后應及時清潔樣品區,避免長時間殘留液體或灰塵。
選購前檢測
檢查溫控均一性、光學通道功能是否正常。
查看運行記錄,確認加熱模塊和光源未接近壽命終點。
核對軟件授權是否完整。
耗材與兼容性
購買前確認可兼容的反應板、試劑品牌及耗材規格,以免后續使用受限。
售后與配件
優先選擇有維修保障或配件供應的渠道,減少維護風險。
特性 | LightCycler 480 II | LightCycler 96 |
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通量 | 高(96/384孔板) | 中(96孔板/8連管) |
光學通道 | 多達5色,適合復雜多重分析 | 4–5色,適合常規多重檢測 |
適用場景 | 大規模科研、臨床高通量檢測 | 常規檢測、教學、日常科研 |
操作難度 | 略高,需要一定培訓 | 界面友好,上手快 |
數據分析 | 功能豐富,模塊化分析 | 功能簡潔,適合基礎分析 |
程序優化:針對不同實驗(如基因表達、病原體檢測、SNP分型)建立獨立的模板程序。
溫控梯度實驗:在新項目中先做退火溫度優化,提高特異性和擴增效率。
定期校準:建議每半年或一年進行一次光學和溫控系統的校準。
數據管理:二手設備可能無長期質保,建議每次運行后立即保存并備份數據,防止軟件或硬盤故障造成丟失。
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