賽默飛(Thermo Fisher Scientific)推出的 Countess? 3 和 Countess? 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,是目前市場上領(lǐng)先的細(xì)胞計(jì)數(shù)解決方案,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、基因編輯、疫苗研發(fā)、CAR-T 細(xì)胞治療等領(lǐng)域。以下是對這兩款儀器的詳細(xì)介紹,涵蓋其核心技術(shù)、功能特點(diǎn)、應(yīng)用場景、操作流程、優(yōu)勢與不足等方面。
Countess? 3 是一款明場自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,采用先進(jìn)的機(jī)器學(xué)習(xí)算法,能夠在不到 30 秒的時(shí)間內(nèi)提供準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)和活性測定。其主要特點(diǎn)包括:
自動(dòng)化功能:自動(dòng)照明、自動(dòng)聚焦、自動(dòng)捕獲圖像、自動(dòng)計(jì)數(shù)和自動(dòng)保存結(jié)果,簡化操作流程,提高工作效率。
高精度計(jì)數(shù):支持細(xì)胞濃度范圍為 1 × 10? 至 1 × 10? 個(gè)細(xì)胞/mL,適用于多種細(xì)胞類型的計(jì)數(shù)。
兼容性強(qiáng):支持使用一次性細(xì)胞計(jì)數(shù)板和可重復(fù)使用計(jì)數(shù)板,滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
數(shù)據(jù)管理:支持將計(jì)數(shù)結(jié)果保存為多種格式(如 PNG、JPG、TIFF、PDF、CSV、FCS),方便數(shù)據(jù)分析和存檔。
Countess? 3 FL 是 Countess? 3 的升級版,除了具備 Countess? 3 的所有功能外,還增加了熒光計(jì)數(shù)功能,支持明場和熒光模式下的細(xì)胞計(jì)數(shù)和活性測定。其主要特點(diǎn)包括:
熒光功能:支持最多兩個(gè)可更換的 EVOS LED 光立方,擴(kuò)展了熒光計(jì)數(shù)的范圍,適用于 GFP、RFP、DAPI 等多種熒光染料。
多功能應(yīng)用:除常規(guī)的細(xì)胞計(jì)數(shù)外,還可用于細(xì)胞活性、凋亡、轉(zhuǎn)染效率、熒光蛋白表達(dá)等多種分析。
優(yōu)化染料:配合 ReadyCount 系列染料使用,提供更高的靈敏度和特異性,特別適用于復(fù)雜樣本的分析。
Countess? 3 和 Countess? 3 FL 均采用深度學(xué)習(xí)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法,實(shí)現(xiàn)高準(zhǔn)確度的細(xì)胞計(jì)數(shù)。即使對于具有挑戰(zhàn)性的細(xì)胞樣品類型(如成團(tuán)細(xì)胞、碎片較多的樣本等),也能提供可靠的計(jì)數(shù)結(jié)果。與傳統(tǒng)的手動(dòng)血球計(jì)數(shù)板相比,AI 算法能夠顯著減少用戶間的差異,提高數(shù)據(jù)的一致性和可重復(fù)性。
這兩款儀器均具備自動(dòng)照明、自動(dòng)聚焦、自動(dòng)捕獲圖像、自動(dòng)計(jì)數(shù)和自動(dòng)保存結(jié)果的功能。用戶只需將處理好的細(xì)胞樣本放入計(jì)數(shù)板并插入儀器,系統(tǒng)即可自動(dòng)完成所有操作,省時(shí)省力,減少人為操作誤差。
Countess? 3 和 Countess? 3 FL 支持將計(jì)數(shù)結(jié)果保存為多種格式(如 PNG、JPG、TIFF、PDF、CSV、FCS),并可通過 USB 或 Wi-Fi 將數(shù)據(jù)傳輸至計(jì)算機(jī)或云端平臺,方便數(shù)據(jù)分析和存檔。此外,儀器還支持生成包含結(jié)果、圖像和設(shè)置參數(shù)的可打印 PDF 報(bào)告,滿足實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制和合規(guī)性要求。
Countess? 3 FL 配備最多兩個(gè)可更換的 EVOS LED 光立方,支持多種熒光染料的檢測,擴(kuò)展了熒光計(jì)數(shù)的應(yīng)用范圍。用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的光立方,實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞活性、凋亡、轉(zhuǎn)染效率、熒光蛋白表達(dá)等多種分析。
樣本準(zhǔn)備:取 10 μL 細(xì)胞樣本,與 10 μL 臺盼藍(lán)染料或其他所需染料(如 ReadyCount 系列染料)混合,確?;靹?。
加載樣本:將混合后的樣本滴加到一次性細(xì)胞計(jì)數(shù)板或可重復(fù)使用計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)腔室中。
插入儀器:將裝有樣本的計(jì)數(shù)板插入 Countess? 3 或 Countess? 3 FL 儀器的計(jì)數(shù)槽。
自動(dòng)計(jì)數(shù):儀器自動(dòng)完成照明、聚焦、圖像捕獲、細(xì)胞計(jì)數(shù)和結(jié)果保存等操作,整個(gè)過程無需人工干預(yù)。
結(jié)果查看與導(dǎo)出:通過儀器的觸摸屏查看計(jì)數(shù)結(jié)果,并可將數(shù)據(jù)保存為所需格式,或通過 USB 或 Wi-Fi 導(dǎo)出至計(jì)算機(jī)或云端平臺。
細(xì)胞培養(yǎng)監(jiān)控:實(shí)時(shí)監(jiān)測細(xì)胞生長情況,確保細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量。
細(xì)胞傳代與凍存:準(zhǔn)確計(jì)算細(xì)胞濃度,為細(xì)胞傳代和凍存提供數(shù)據(jù)支持。
基因編輯與轉(zhuǎn)染效率評估:評估 CRISPR-Cas9 等基因編輯方法的效率,分析轉(zhuǎn)染效率。
細(xì)胞治療研究:在 CAR-T 細(xì)胞等細(xì)胞治療研究中,評估細(xì)胞質(zhì)量和活性。
疫苗研發(fā):在疫苗研發(fā)過程中,監(jiān)測細(xì)胞培養(yǎng)和病毒感染情況。
高準(zhǔn)確度:AI 算法提供高精度的細(xì)胞計(jì)數(shù),減少人為誤差。
操作簡便:自動(dòng)化操作流程,降低操作難度,節(jié)省時(shí)間。
數(shù)據(jù)多樣性:支持多種數(shù)據(jù)格式輸出,滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
靈活性強(qiáng):Countess? 3 FL 支持熒光計(jì)數(shù),擴(kuò)展應(yīng)用范圍。
價(jià)格較高:相較于傳統(tǒng)的手動(dòng)計(jì)數(shù)方法,設(shè)備投資較大。
對樣本質(zhì)量要求高:樣本需均勻,避免氣泡和雜質(zhì),確保計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。
熒光功能需額外配件:Countess? 3 FL 的熒光功能需要購買額外的光立方和染料。
Countess? 3 和 Countess? 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀憑借其先進(jìn)的 AI 算法、自動(dòng)化操作流程和多樣化的數(shù)據(jù)輸出功能,成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具。盡管存在一定的設(shè)備投資成本,但其帶來的高效率和高準(zhǔn)確度,能夠顯著提升實(shí)驗(yàn)室的工作效率和數(shù)據(jù)質(zhì)量,值得在細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。
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