NanoDrop Eight 是 Thermo Fisher Scientific 推出的一款多通道超微量分光光度計,專為高通量檢測設計。它能夠在一次運行中同時檢測 8 個樣品,樣品需求量僅需 1–2 微升,廣泛應用于核酸、蛋白質以及帶有熒光標記物的分子定量分析。掌握其詳細操作步驟是確保實驗結果準確可靠的關鍵。本章將從開機準備到結果導出,逐一解析操作流程。
設備檢查
確認儀器電源、顯示屏及光學臂正常。
檢查檢測平臺是否干凈無殘留液體。
檢查八通道檢測孔是否無塵、無劃痕。
環境要求
放置在穩固的實驗臺上,避免震動。
室溫保持在 20–25℃,濕度適中。
避免陽光直射,保持干燥環境。
樣品準備
提前配制檢測所需的核酸、蛋白質或其他樣品。
使用去離子水或對應緩沖液作為空白對照。
樣品濃度不宜過高,如超出范圍需稀釋。
移液器、無酶吸頭、無核酸污染操作環境。
電源開啟
接通電源后按下開關鍵,設備開始自檢。顯示屏會自動加載主界面。
預熱光源
初次開機或長時間未使用時,需預熱 2–3 分鐘以穩定光源。
軟件登錄
選擇用戶賬號進入系統界面,方便保存和區分數據。
基線校正
滴加 1–2 微升空白緩沖液于檢測平臺。
合上光學臂,選擇“Blank”進行校正。
系統自動記錄基線,保證后續結果準確。
使用移液器取 1–2 μL 樣品,緩慢滴加在檢測孔中央。
確保液滴覆蓋檢測窗口,避免氣泡或液體外溢。
對于多樣品檢測,可依次加載 8 個孔位。
NanoDrop Eight 內置多種模式:
核酸模式:在 260 nm 檢測 DNA、RNA 濃度。
蛋白質模式:在 280 nm 檢測蛋白濃度。
全波長掃描:190–850 nm,獲取完整光譜。
熒光染料模式:針對 Cy3、Cy5 等標記物。
用戶根據實驗需求選擇相應模式。
合上光學臂,點擊“Start”。
儀器自動進行掃描,單次測定約需 5–10 秒。
結果包括吸光度、濃度、純度比值及光譜曲線。
濃度值:自動計算并顯示。
純度比值:如 A260/A280、A260/A230,幫助評估樣品質量。
光譜曲線:直觀展示吸收峰。
保存結果
點擊“Save”,結果自動存入系統存儲器。
可按樣品編號或日期進行命名。
導出數據
USB 接口導出:生成 Excel 表格或 PDF 報告。
網絡接口導出:可直接傳輸至實驗室服務器。
批量處理
軟件支持多樣品曲線疊加對比。
自動生成統計報告,含平均值、標準差。
檢測值不穩定
原因:液滴未完全覆蓋窗口或有氣泡。
解決:重新取樣,確保操作規范。
純度比值偏低
原因:樣品中有鹽類、蛋白或有機物污染。
解決:重新提取或純化樣品。
濃度過高提示
原因:樣品吸光度超出檢測范圍。
解決:稀釋后重新檢測。
信號異常弱
原因:檢測平臺未清潔干凈。
解決:用無絨紙或去離子水清潔窗口。
清潔
每次測量后立即清潔檢測平臺。
使用去離子水或 70% 乙醇清洗,防止殘留。
關機保養
長時間不使用應關閉電源。
建議覆蓋防塵罩,避免灰塵進入。
校準與檢測
定期進行標準溶液檢測,確認性能。
必要時聯系廠家進行維護保養。
RNA 檢測
滴加 RNA 樣品 2 μL,結果顯示濃度 150 ng/μL,A260/A280 值為 2.0,表明純度良好。
蛋白質檢測
檢測 BSA 溶液,結果濃度 2.4 mg/mL,符合實驗預期。
多樣品檢測
同時加載 8 個 DNA 樣品,短時間內獲得完整檢測結果。
NanoDrop Eight 的操作步驟簡潔明了,主要流程包括:
操作前準備與基線校正;
樣品加載與模式選擇;
自動檢測與結果查看;
數據保存與導出;
清潔與維護。
其優勢體現在:
樣品體積極小,避免浪費;
八通道同時檢測,大幅提高效率;
檢測結果直觀可靠,便于數據管理;
適用于核酸、蛋白質及多種標記分子。
通過規范的操作步驟,NanoDrop Eight 能夠為科研人員提供高效、準確的實驗數據,成為分子生物學和生物醫學實驗室的重要工具。
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