比色分析是分光光度計最常見、最實用的功能之一,它通過光與物質的相互作用實現定性與定量檢測。賽默飛分光光度計BioMate 160憑借其高靈敏度、寬光譜范圍及友好操作界面,在核酸、蛋白質、藥物成分、環(huán)境污染物以及食品分析等比色實驗中被廣泛采用。其優(yōu)勢在于不僅提供高精度的光學測量結果,還能通過完善的軟件功能輔助用戶實現快速計算與結果追溯。
BioMate 160比色分析基于朗伯-比爾定律:
A=ε?c?lA = \varepsilon \cdot c \cdot lA=ε?c?l
其中,A為吸光度,ε為摩爾吸光系數,c為溶液濃度,l為光程。通過測量吸光度即可推算溶液濃度。
BioMate 160采用雙光束系統,樣品池與參比池同時檢測,有效消除光源波動與背景干擾,提高了比色實驗的穩(wěn)定性和重復性。
固定波長模式:常用于單一物質的濃度測定,例如核酸、蛋白定量。
光譜掃描模式:可對樣品在整個波長范圍內的吸收曲線進行測定,便于尋找特征峰。
波長范圍覆蓋190–1100 nm,適用于紫外與可見光分析。
光度準確度高,確保比色定量結果可信。
軟件內置多種比色計算模塊,例如:
標準曲線法:適合多點定量分析。
單點定量法:快速計算濃度。
動力學曲線:用于酶活性或反應速率研究。
支持1 cm標準比色皿、多通道比色皿以及微量比色皿,滿足不同樣品體積與檢測需求。
測定結果可直接生成圖表和報告,支持U盤、網絡及LIMS系統導出,方便進一步統計和存檔。
使用去離子水或緩沖液配置溶液,避免雜質影響。
樣品濃度應處于儀器檢測的線性范圍內。
使用溶劑或緩沖液作為空白,保證數據的準確性。
雙光束系統下參比池需與樣品池保持一致條件。
根據分析物特征選擇最佳檢測波長,例如核酸在260 nm、蛋白質在280 nm處有特征峰。
可通過光譜掃描確認最適宜的檢測點。
將樣品置入比色皿,插入樣品池。
儀器自動完成吸光度或透過率測定。
通過軟件計算濃度或繪制標準曲線。
結果可即時保存,報告可導出為PDF或Excel格式,便于科研記錄和審計。
檢測波長:260 nm。
空白參比:純水或TE緩沖液。
分析內容:DNA/RNA濃度及純度(260/280比值)。
檢測波長:280 nm或采用比色試劑法(如Bradford法、BCA法)。
優(yōu)勢:快速判斷蛋白純度及濃度。
對藥物活性成分進行定量,滿足藥典要求。
可建立標準曲線,進行定量分析。
在水質監(jiān)測中,用于檢測硝酸鹽、磷酸鹽、重金屬等。
通過比色反應生成有色化合物,吸光度與濃度成正比。
常用于食品添加劑、色素含量的分析。
快速比色法有助于生產環(huán)節(jié)的質量控制。
通過標準曲線驗證檢測范圍內的線性關系,確保結果可用。
對同一樣品進行多次測量,計算標準偏差,評估重復性。
光學誤差:通過定期校準濾光片控制。
樣品誤差:避免氣泡、懸浮顆粒對光程的影響。
操作誤差:規(guī)范樣品量與操作流程。
系統內置用戶權限管理與數據追溯功能。
符合GLP和GMP要求,適用于藥企和科研實驗室。
比色皿應保持清潔,避免劃痕和污染。
樣品體積應完全覆蓋光路,防止檢測失敗。
定期更換光源(氘燈、鎢燈),保持光強穩(wěn)定。
檢測過程中保持實驗室環(huán)境穩(wěn)定,避免強光與溫度波動。
建立實驗室內部質控圖表,持續(xù)跟蹤儀器性能。
隨著實驗室自動化與智能化發(fā)展,BioMate 160的比色分析功能也在不斷拓展:
高通量檢測:未來可與多孔板檢測系統結合,提升實驗效率。
智能算法輔助:通過內置軟件自動識別最佳波長與曲線擬合方法。
遠程監(jiān)控與質控:結合云平臺實現儀器運行數據的實時追蹤。
賽默飛分光光度計BioMate 160的比色分析功能以其高精度光學系統、完善的軟件支持和強大的數據處理能力,成為科研與應用檢測中的可靠工具。通過規(guī)范的操作流程、嚴格的質控措施以及豐富的應用案例,該儀器不僅能夠滿足基礎研究的需求,還能在藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測和食品檢測等領域發(fā)揮重要作用。比色分析作為實驗室最常見的檢測手段,在BioMate 160的加持下,更加高效、精準和符合國際標準,為科研與產業(yè)發(fā)展提供了堅實的技術支持。
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