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分光光度法是生命科學研究與應用中最常見的定量分析手段之一，尤其在核酸、蛋白質以及其他生物大分子濃度與純度檢測中發揮著核心作用。賽默飛NanoDrop Eight分光光度計作為NanoDrop家族的升級版，憑借其多通道檢測、高靈敏度、快速操作等優勢，已經成為分子生物學實驗室、臨床檢測機構和生物制藥企業的常用工具。與傳統單通道設備相比，NanoDrop Eight在樣品通量、檢測精度和數據管理方面均實現了顯著提升。
本文將圍繞NanoDrop Eight的定量分析功能，全面介紹其原理、方法、操作步驟、應用范圍和優勢，以幫助科研人員在日常實驗中高效利用該設備。
NanoDrop Eight是一款微量多通道紫外-可見分光光度計：
檢測通道：一次可同時測定8個樣品，大大提升通量。
檢測范圍：波長覆蓋190–850 nm，滿足核酸、蛋白質以及其他生物樣品檢測需求。
樣品體積：僅需1–2 μL即可完成檢測，適合珍貴或稀缺樣品。
采用專利微量樣品固定技術，樣品通過表面張力固定于測量柱之間，無需比色皿。
光程長度可自動調整（0.5 mm與1.0 mm），保證寬濃度范圍檢測。
高靈敏度硅光二極管檢測器，噪聲低、線性范圍寬。
DNA與RNA濃度測定：利用260 nm處的吸收峰計算濃度。
純度評估：通過A260/A280比值（理想值約為1.8–2.0）判斷蛋白污染情況；A260/A230比值用于評估有機物或鹽類污染。
應用場景：基因組DNA提取、質粒純化、反轉錄前RNA定量、測序樣品質量評估等。
280 nm吸收法：基于芳香族氨基酸殘基的吸收峰測定蛋白濃度。
BCA、Bradford、Lowry等比色法：可通過比色試劑與蛋白反應后檢測特定波長的吸收。
純度分析：通過全波長掃描識別雜質峰，確保結果可靠。
支持190–850 nm全光譜掃描，繪制完整吸收曲線。
可用于識別溶液中的污染物或輔助確認樣品特性。
一次可同時檢測8個樣品，大幅提高效率。
系統自動校準光程差異，保證數據可比性。
檢測范圍覆蓋2–15,000 ng/μL核酸濃度，無需額外稀釋，大幅節省操作時間。
打開電源，等待系統自檢完成。
進入主界面，選擇檢測模式（核酸、蛋白、全波長掃描等）。
預熱光源約1–2分鐘，確保穩定。
選擇對應緩沖液或溶劑作為空白對照。
使用微量移液器準確吸取1–2 μL樣品，避免產生氣泡。
在檢測柱上滴加空白液體。
點擊“Blank”功能，系統自動記錄背景吸收值。
擦拭測量柱，確保無殘留。
在測量柱上分別滴加樣品溶液。
關閉樣品臂，啟動檢測。
系統自動輸出吸光度值、濃度結果和純度比值。
檢測結果可存儲在設備內部，也可通過USB或網絡導出。
支持Excel、CSV等常見格式，便于后續分析與歸檔。
濃度計算：C = A260 × ε × 稀釋倍數，其中ε為摩爾消光系數。
純度判斷：
A260/A280 ≈ 1.8 表示DNA純凈；≈2.0 表示RNA純凈。
A260/A230 < 1.8 時，提示可能存在有機物或鹽類污染。
直接測定：在280 nm下讀取吸光度并結合消光系數計算濃度。
比色法結果：依據標準曲線換算未知樣品濃度。
光譜曲線平滑無異常峰值，表明樣品質量較好。
若出現額外峰值，需結合實驗背景判斷是否為污染物。
核酸提取與測序樣品質控。
RNA完整性與純度驗證。
PCR、qPCR與克隆實驗前的濃度標準化。
重組蛋白表達與純化產物定量。
蛋白溶液純度與穩定性研究。
藥物結合實驗中的蛋白含量測定。
血清與血漿核酸檢測。
疫苗研發過程中核酸與蛋白含量檢測。
基因治療與mRNA疫苗生產質控。
食品中DNA條形碼檢測前的樣品濃度確認。
水體或土壤提取核酸定量。
超低樣品需求：僅需1–2 μL，最大程度節省稀缺樣品。
高通量：一次可同時檢測8個樣品，效率提升顯著。
寬濃度范圍：無需稀釋即可直接測定高濃度樣品。
快速便捷：檢測時間通常不超過10秒。
直觀結果：自動輸出濃度、純度比值與光譜曲線。
多模式支持：核酸、蛋白、全波長掃描靈活切換。
樣品體積：保證≥1 μL，避免氣泡干擾光路。
清潔操作：每次檢測后用無絨布或鏡頭紙擦拭測量柱。
空白選擇：必須與樣品溶液體系一致。
樣品均一性：避免懸浮顆粒，必要時進行離心。
溫度與環境：保持穩定實驗環境，避免過度震動。
檢查樣品是否降解或稀釋錯誤。
確認光程是否自動切換正常。
A260/A280過低：蛋白污染。
A260/A230過低：有機物或鹽類殘留。
出現雜峰可能為移液不當或樣品含氣泡。
重復測試以確認是否為儀器噪聲。
若測量柱表面出現殘留，應立即用去離子水清潔并擦干。
賽默飛NanoDrop Eight分光光度計在定量分析方面表現卓越，兼具高通量、低樣品需求、寬濃度范圍和快速檢測等優點。它能夠在短時間內完成核酸、蛋白質及其他生物樣品的定量與純度評估，并輸出直觀的光譜結果。其多通道設計有效提升了實驗效率，特別適合分子生物學、醫藥研發與高通量檢測實驗室使用。通過科學的操作與合理的數據解讀，NanoDrop Eight不僅能為實驗提供可靠的數據支持，還能大幅度提升實驗室的整體工作效率。
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