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紫外分光光度法是一種經典而廣泛應用的定量與定性分析手段。其原理是基于物質在紫外光區（通常為 190–400 nm）對特定波長光的吸收，通過測量吸光度來推算物質的濃度和特征。由于許多生物分子（如核酸、蛋白質、輔酶等）、有機化合物以及部分無機離子在紫外區具有特征吸收峰，因此紫外檢測在 分子生物學、臨床醫學、藥物分析、環境監測和食品檢測 等領域具有重要價值。
賽默飛Thermo Scientific Evolution One分光光度計，作為一款覆蓋紫外至可見光范圍的高性能光學儀器，憑借其 高光學分辨率、低噪聲電子系統和智能化數據處理能力，在紫外檢測中展現出優異的靈敏度和穩定性。本文將系統性介紹其紫外檢測的原理、技術優勢、應用場景和未來發展趨勢。
吸收定律
紫外檢測遵循朗伯-比爾定律（A = εbc）。其中：
A：吸光度
ε：摩爾吸收系數
b：光程長度
c：溶液濃度
通過測定樣品在特定波長下的吸光度，可反推出物質濃度。
核酸檢測
DNA和RNA在260 nm處有最大吸收峰。
260/280比值常用于評估核酸純度。
蛋白質檢測
蛋白質中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在280 nm處有特征吸收。
吸光度與蛋白質濃度呈線性關系。
其他應用
小分子有機化合物：如苯環結構在紫外區有強吸收。
無機離子：部分金屬離子形成絡合物后在紫外區表現吸收。
光源配置
氘燈作為紫外區光源，波長覆蓋190–350 nm。
氘燈光強穩定性高，壽命長，確保長期紫外檢測的重復性。
單色器與光柵
高分辨率光柵，最小帶寬可低至1 nm。
有效抑制雜散光，保證紫外區譜線清晰。
檢測器系統
高靈敏度光電倍增管（PMT），能夠捕捉極弱的紫外信號。
噪聲水平低，信噪比可達到10000:1。
雙光束設計
樣品光路與參比光路同步檢測，實時扣除光源波動。
提高了紫外檢測的基線穩定性。
高靈敏度
最低可檢測核酸濃度為0.5 ng/μL。
對低濃度蛋白質（0.01 mg/mL）依然保持良好線性。
高分辨率
波長精度可達±0.3 nm。
在紫外區能夠區分相近吸收峰，如DNA與RNA混合樣本的區分。
低雜散光
在220 nm處，雜散光小于0.05%。
確保在高吸光度樣本檢測中依然獲得準確結果。
重復性與穩定性
光度重復性 ≤0.001 A。
長時間運行中，基線漂移極小。
核酸定量與純度評估：常用260/280和260/230比值判斷純度。
蛋白質濃度測定：適合于常規蛋白制備與純化流程。
酶動力學研究：通過紫外檢測底物和產物濃度變化。
血液與血漿樣本分析：檢測核酸、蛋白質和代謝物水平。
疾病標志物研究：部分小分子在紫外區有特征吸收。
藥物活性成分定量：小分子藥物常在紫外區有強吸收。
雜質檢測：痕量雜質可通過紫外光譜識別。
溶出度實驗：實時監控藥物在溶液中的釋放速率。
水質檢測：紫外吸收可用于評估有機污染物濃度。
大氣顆粒物分析：部分多環芳烴在紫外區有明顯吸收。
食品添加劑檢測：甜味劑、防腐劑等在紫外區有特征信號。
農藥殘留分析：常見有機磷、氯代物可通過紫外定量。
比色皿選擇
紫外區需使用石英比色皿，避免玻璃吸收。
確保比色皿清潔、無劃痕。
光源維護
氘燈使用壽命有限，應定期監測光強。
光源衰減會直接影響紫外靈敏度。
樣品準備
溶劑應選擇紫外透光性良好的緩沖液。
樣品應澄清透明，避免顆粒或氣泡干擾。
校準與基線
定期進行波長與光度校準。
參比光路應填充與樣品相同的溶劑。
光學性能
Evolution One在190 nm以下的光源強度與穩定性優于傳統機型，適合深紫外檢測。
檢測靈敏度
最低檢測限比傳統儀器低30%以上，適合痕量樣本研究。
智能化程度
內置數據處理軟件，支持自動核酸純度計算與蛋白質定量，無需人工換算。
合規支持
符合21 CFR Part 11法規要求，支持審計追蹤，適合藥企與臨床實驗室。
溫度：過高或過低的環境會影響光學元件和光源穩定性。
濕度：高濕度可能導致石英透鏡結露。
空氣潔凈度：粉塵與有機蒸氣會附著在光學元件上，降低紫外透光率。
電磁干擾：強電磁場可能影響檢測器信號，增加噪聲。
更寬紫外波段覆蓋
未來型號可能進一步延伸至深紫外區（<180 nm），用于更高分辨率的分子檢測。
微量樣品檢測
結合微流控芯片，實現納升級樣品的紫外定量。
AI與大數據結合
通過算法分析紫外光譜特征，提升復雜樣本定量的準確性。
便攜化與自動化
將紫外檢測模塊化，應用于現場快速檢測與自動實驗平臺。
賽默飛Evolution One分光光度計在紫外檢測方面具備 高靈敏度、寬波長范圍、低雜散光和優異的基線穩定性，可滿足從基礎科研到應用檢測的多樣化需求。其設計優勢不僅體現在光學系統的精密性，還包括智能化的數據處理和嚴格的合規性支持。
在分子生物學、醫學臨床、制藥質量控制、環境監測和食品安全等領域，Evolution One的紫外檢測功能為科研與應用提供了堅實的技術支持。隨著未來深紫外檢測、AI輔助分析和微流控技術的發展，該系列將在高精度與智能化方向繼續引領行業。
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